1.(酵母細(xì)胞的固定化)基礎(chǔ)知識(shí)
⑴.(有哪些?固定化酶應(yīng)用的實(shí)例?
①.用于高果糖漿的生產(chǎn);
小資料：高果糖漿是指果糖含量為42%左右的糖漿;
可以作為蔗糖的替代品;
對(duì)人類健康有益，不會(huì)引起肥胖、糖尿病心血管疾病。
②.怎樣生產(chǎn)高果糖漿?
A.原料：葡萄糖;
B.酶：葡萄糖異構(gòu)酶(穩(wěn)定性好，能持續(xù)發(fā)揮作用。);
C.方法：使用固定化技術(shù)，將酶固定在顆粒狀載體上;
將酶顆粒裝到反應(yīng)柱內(nèi)(如圖4-5);
將葡萄糖溶液從反應(yīng)柱上端注入;
與酶接觸，發(fā)生反應(yīng)，生成果糖;
生成果糖從反應(yīng)柱下端流出。
⑵.(什么是)固定化細(xì)胞技術(shù)?
固定化酶和固定化細(xì)胞是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù);
包括：包埋法;
化學(xué)結(jié)合法(將酶分子或細(xì)胞相互結(jié)合，或?qū)⑵浣Y(jié)合到載體上);
物理吸附法;
①.一般來說，酶更適合哪種方法固定化?為什么?
化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化;
因?yàn)槊阜肿虞^小;
②.一般來說，細(xì)胞更適合用哪種方法固定化?為什么?
細(xì)胞多采用包埋法固定化;
因?yàn)榧?xì)胞體積較大。
③.化學(xué)結(jié)合法常用的載體有哪些?
明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維、聚丙烯酰胺等等
④.選擇哪種載體包埋酵母菌細(xì)胞?
選用海藻酸鈉作載體包埋酵母細(xì)胞;
2.(酵母細(xì)胞的固定化)實(shí)驗(yàn)操作(包括哪些內(nèi)容?)
⑴.(怎樣進(jìn)行)酵母菌細(xì)胞的活化?
稱取1g干酵母，放入50mL的小燒杯中，加入蒸餾水10mL，用玻璃棒攪拌，使酵母菌細(xì)胞混合
均勻，成糊狀，放置1h左右，使其活化。
⑵.(怎樣)配制物質(zhì)量濃度為0.025mol/L的CaCl2溶液?
稱取無水CaCl20.83g，放入200mL的燒杯中，加入150mL的蒸餾水，使其充分溶解，待用。
⑶.(怎樣)配制海藻酸鈉溶液?
稱取0.7g海藻酸鈉，放入50mL小燒杯中，加入10ml水，酒精燈加熱，邊加熱邊攪拌，將海藻
酸鈉調(diào)成糊狀，直至完全溶化，用蒸餾水定容至10mL。
注意：加熱時(shí)要用小火，或者間斷加熱，反復(fù)幾次，直到海藻酸鈉溶化為止。
⑷.(怎樣將)海藻酸鈉溶液與酵母菌細(xì)胞混合?
將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，加入已活化的酵母菌細(xì)胞，進(jìn)行充分?jǐn)嚢瑁蛊浠旌?BR> 均勻，再轉(zhuǎn)移至注射其中。
⑸.(怎樣)固定化酵母菌細(xì)胞?
以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中，觀察液滴在CaCl2溶液中
形成凝膠珠的情形。
將這些凝膠珠在CaCl2溶液中浸泡30min左右。
3.(怎樣)用固定化酵母菌發(fā)酵?
⑴.將固定化好的酵母菌細(xì)胞(凝膠珠)用蒸餾水沖洗2～3次;
⑵.將150mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的葡萄糖溶液轉(zhuǎn)移到200mL的錐形瓶中，再加入固定好的酵母菌細(xì)胞，
置于25℃下發(fā)酵24h。
4.(酵母細(xì)胞的固定化實(shí)驗(yàn))操作提示
⑴.海藻酸鈉在水中溶解速度較慢，需要通過加熱促進(jìn)其溶解;
⑵.溶解海藻酸鈉，采用小火間斷加熱的方法，并不斷攪拌;
⑶.加熱太快，海藻酸鈉會(huì)焦糊。
⑴.(有哪些?固定化酶應(yīng)用的實(shí)例?
①.用于高果糖漿的生產(chǎn);
小資料：高果糖漿是指果糖含量為42%左右的糖漿;
可以作為蔗糖的替代品;
對(duì)人類健康有益，不會(huì)引起肥胖、糖尿病心血管疾病。
②.怎樣生產(chǎn)高果糖漿?
A.原料：葡萄糖;
B.酶：葡萄糖異構(gòu)酶(穩(wěn)定性好，能持續(xù)發(fā)揮作用。);
C.方法：使用固定化技術(shù)，將酶固定在顆粒狀載體上;
將酶顆粒裝到反應(yīng)柱內(nèi)(如圖4-5);
將葡萄糖溶液從反應(yīng)柱上端注入;
與酶接觸，發(fā)生反應(yīng)，生成果糖;
生成果糖從反應(yīng)柱下端流出。
⑵.(什么是)固定化細(xì)胞技術(shù)?
固定化酶和固定化細(xì)胞是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù);
包括：包埋法;
化學(xué)結(jié)合法(將酶分子或細(xì)胞相互結(jié)合，或?qū)⑵浣Y(jié)合到載體上);
物理吸附法;
①.一般來說，酶更適合哪種方法固定化?為什么?
化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化;
因?yàn)槊阜肿虞^小;
②.一般來說，細(xì)胞更適合用哪種方法固定化?為什么?
細(xì)胞多采用包埋法固定化;
因?yàn)榧?xì)胞體積較大。
③.化學(xué)結(jié)合法常用的載體有哪些?
明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維、聚丙烯酰胺等等
④.選擇哪種載體包埋酵母菌細(xì)胞?
選用海藻酸鈉作載體包埋酵母細(xì)胞;
2.(酵母細(xì)胞的固定化)實(shí)驗(yàn)操作(包括哪些內(nèi)容?)
⑴.(怎樣進(jìn)行)酵母菌細(xì)胞的活化?
稱取1g干酵母，放入50mL的小燒杯中，加入蒸餾水10mL，用玻璃棒攪拌，使酵母菌細(xì)胞混合
均勻，成糊狀，放置1h左右，使其活化。
⑵.(怎樣)配制物質(zhì)量濃度為0.025mol/L的CaCl2溶液?
稱取無水CaCl20.83g，放入200mL的燒杯中，加入150mL的蒸餾水，使其充分溶解，待用。
⑶.(怎樣)配制海藻酸鈉溶液?
稱取0.7g海藻酸鈉，放入50mL小燒杯中，加入10ml水，酒精燈加熱，邊加熱邊攪拌，將海藻
酸鈉調(diào)成糊狀，直至完全溶化，用蒸餾水定容至10mL。
注意：加熱時(shí)要用小火，或者間斷加熱，反復(fù)幾次，直到海藻酸鈉溶化為止。
⑷.(怎樣將)海藻酸鈉溶液與酵母菌細(xì)胞混合?
將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，加入已活化的酵母菌細(xì)胞，進(jìn)行充分?jǐn)嚢瑁蛊浠旌?BR> 均勻，再轉(zhuǎn)移至注射其中。
⑸.(怎樣)固定化酵母菌細(xì)胞?
以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中，觀察液滴在CaCl2溶液中
形成凝膠珠的情形。
將這些凝膠珠在CaCl2溶液中浸泡30min左右。
3.(怎樣)用固定化酵母菌發(fā)酵?
⑴.將固定化好的酵母菌細(xì)胞(凝膠珠)用蒸餾水沖洗2～3次;
⑵.將150mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的葡萄糖溶液轉(zhuǎn)移到200mL的錐形瓶中，再加入固定好的酵母菌細(xì)胞，
置于25℃下發(fā)酵24h。
4.(酵母細(xì)胞的固定化實(shí)驗(yàn))操作提示
⑴.海藻酸鈉在水中溶解速度較慢，需要通過加熱促進(jìn)其溶解;
⑵.溶解海藻酸鈉，采用小火間斷加熱的方法，并不斷攪拌;
⑶.加熱太快，海藻酸鈉會(huì)焦糊。