化學(xué)致突變物的檢測是公衛(wèi)執(zhí)業(yè)醫(yī)師衛(wèi)生毒理學(xué)要求掌握的內(nèi)容。
化學(xué)致突變物的檢測所觀察的現(xiàn)象并不一定就是三類遺傳學(xué)損傷，而可能是致突變過程中發(fā)生的其他作用（事件）。
（一）致突變試驗的遺傳學(xué)終點和試驗組合的選擇
將致突變試驗觀察到的現(xiàn)象所反映的各種遺傳學(xué)事件稱為遺傳學(xué)終點。遺傳學(xué)終點分為4類：①基因突變；②染色體畸變；③不分離；④原發(fā)性DNA損傷。
成組試驗組合的原則為：①多個遺傳學(xué)終點；②原核生物和真核生物；③體外試驗和體內(nèi)試驗；④體細胞和生殖細胞。
（二）常用的致突變試驗方法
1.細菌回復(fù)突變試驗-鼠傷寒沙門菌回變試驗（Ames試驗）
原核生物體外試驗、基因突變。
鼠傷寒沙門菌試驗菌株（突變型）不能自行合成組氨酸，在不含組氨酸的最低營養(yǎng)平皿上不能生長。突變型試驗菌株可被各種誘變因素誘導(dǎo)，回復(fù)突變成野生型，即恢復(fù)了合成組氨酸的能力，可在此平皿上生長成可見菌落。
鼠傷寒沙門菌野生型（原養(yǎng)型）←→組氨酸營養(yǎng)缺陷型突變株（his+） 回復(fù)突變?。╤is）
如果受試物處理組回變菌落數(shù)顯著超過陰性對照組；并有劑量反應(yīng)關(guān)系，即可判定受試物為鼠傷寒沙門菌的致突變物。
Ames試驗中使用的標(biāo)準菌株為TA97、TA98、TA 100和TA 102.his-突變外，附加突變：①深粗糙型突變（rfa）、②切除修復(fù)基因uvrB缺失（△uvrB）和③抗藥因子（R因子即抗氨芐青霉素的PKMl01質(zhì)粒和抗四環(huán)素的PAQ1質(zhì)粒）。
TA97和TA98主要用于檢測移碼型突變；TA100和TA102可檢測堿基置換。
有點試驗和摻入試驗兩種。應(yīng)分別進行不加及加代謝活化系統(tǒng)的試驗，常用為S9混合液，即用多氯聯(lián)苯誘導(dǎo)的大鼠肝勻漿經(jīng)9000 g離心得到的上清液，再加上NADP及葡萄糖-6-磷酸等輔助因子。
2.微核試驗
體內(nèi)試驗，遺傳學(xué)終點是染色體畸變和不分離。
微核是染色體斷片或因紡錘體受損傷而遲滯的整個染色體，分裂的后期仍留在子細胞的胞質(zhì)內(nèi)。檢測斷裂劑和有絲分裂毒物。
常用的是嚙齒類動物骨髓嗜多染紅細胞。在主核排出時微核可留在胞漿中。
3.染色體畸變試驗
細胞遺傳學(xué)檢驗，即制備中期相染色體標(biāo)本，在光鏡下觀察染色體形態(tài)結(jié)構(gòu)和數(shù)目改變。遺傳學(xué)終點為染色體畸變。
嚙齒類動物睪丸細胞染色體畸變試驗，用于檢測對生殖細胞的染色體損傷作用。
4.程序外DNA合成試驗
DNA受損后，發(fā)生在正常復(fù)制合成期（S期）以外DNA的修復(fù)合成，稱為程序外DNA合成（UDS）或DNA修復(fù)合成。
3H-胸苷摻入量，反映DNA修復(fù)合成情況。需將受試細胞分裂阻斷同步化于G1期，再用羥基脲抑制殘存的S期半保留DNA復(fù)制，放射自顯影法和液閃計數(shù)法確定3H-胸苷摻入量。
化學(xué)致突變物的檢測所觀察的現(xiàn)象并不一定就是三類遺傳學(xué)損傷，而可能是致突變過程中發(fā)生的其他作用（事件）。
（一）致突變試驗的遺傳學(xué)終點和試驗組合的選擇
將致突變試驗觀察到的現(xiàn)象所反映的各種遺傳學(xué)事件稱為遺傳學(xué)終點。遺傳學(xué)終點分為4類：①基因突變；②染色體畸變；③不分離；④原發(fā)性DNA損傷。
成組試驗組合的原則為：①多個遺傳學(xué)終點；②原核生物和真核生物；③體外試驗和體內(nèi)試驗；④體細胞和生殖細胞。
（二）常用的致突變試驗方法
1.細菌回復(fù)突變試驗-鼠傷寒沙門菌回變試驗（Ames試驗）
原核生物體外試驗、基因突變。
鼠傷寒沙門菌試驗菌株（突變型）不能自行合成組氨酸，在不含組氨酸的最低營養(yǎng)平皿上不能生長。突變型試驗菌株可被各種誘變因素誘導(dǎo)，回復(fù)突變成野生型，即恢復(fù)了合成組氨酸的能力，可在此平皿上生長成可見菌落。
鼠傷寒沙門菌野生型（原養(yǎng)型）←→組氨酸營養(yǎng)缺陷型突變株（his+） 回復(fù)突變?。╤is）
如果受試物處理組回變菌落數(shù)顯著超過陰性對照組；并有劑量反應(yīng)關(guān)系，即可判定受試物為鼠傷寒沙門菌的致突變物。
Ames試驗中使用的標(biāo)準菌株為TA97、TA98、TA 100和TA 102.his-突變外，附加突變：①深粗糙型突變（rfa）、②切除修復(fù)基因uvrB缺失（△uvrB）和③抗藥因子（R因子即抗氨芐青霉素的PKMl01質(zhì)粒和抗四環(huán)素的PAQ1質(zhì)粒）。
TA97和TA98主要用于檢測移碼型突變；TA100和TA102可檢測堿基置換。
有點試驗和摻入試驗兩種。應(yīng)分別進行不加及加代謝活化系統(tǒng)的試驗，常用為S9混合液，即用多氯聯(lián)苯誘導(dǎo)的大鼠肝勻漿經(jīng)9000 g離心得到的上清液，再加上NADP及葡萄糖-6-磷酸等輔助因子。
2.微核試驗
體內(nèi)試驗，遺傳學(xué)終點是染色體畸變和不分離。
微核是染色體斷片或因紡錘體受損傷而遲滯的整個染色體，分裂的后期仍留在子細胞的胞質(zhì)內(nèi)。檢測斷裂劑和有絲分裂毒物。
常用的是嚙齒類動物骨髓嗜多染紅細胞。在主核排出時微核可留在胞漿中。
3.染色體畸變試驗
細胞遺傳學(xué)檢驗，即制備中期相染色體標(biāo)本，在光鏡下觀察染色體形態(tài)結(jié)構(gòu)和數(shù)目改變。遺傳學(xué)終點為染色體畸變。
嚙齒類動物睪丸細胞染色體畸變試驗，用于檢測對生殖細胞的染色體損傷作用。
4.程序外DNA合成試驗
DNA受損后，發(fā)生在正常復(fù)制合成期（S期）以外DNA的修復(fù)合成，稱為程序外DNA合成（UDS）或DNA修復(fù)合成。
3H-胸苷摻入量，反映DNA修復(fù)合成情況。需將受試細胞分裂阻斷同步化于G1期，再用羥基脲抑制殘存的S期半保留DNA復(fù)制，放射自顯影法和液閃計數(shù)法確定3H-胸苷摻入量。