磺胺類藥物的分析
☆ ☆考點1：碘胺類藥物及其結(jié)構(gòu)
磺胺類藥物是一類用于治療細菌感染性疾病的合成藥物，均具有對氨基苯磺酰胺的基本結(jié)構(gòu)?！吨袊幍洹肥蛰d有磺胺甲 唑、磺胺嘧啶、磺胺異 唑等磺胺類藥物多種，其中磺胺甲 唑、磺胺嘧啶的結(jié)構(gòu)如下：
兩個藥物均有對氨基苯磺酰胺的基本結(jié)構(gòu)，其中磺胺甲 唑磺酰胺基N原子上為5-甲基異唑基取代，而磺胺嘧啶則為嘧啶基取代。兩個藥物均有芳伯氨基，因此可以發(fā)生重氮化反應和重氮化-偶合反應，可用于含量測定和鑒別。磺酰胺基氮原子上的氫受磺?；娮有挠绊?，比較活潑，可以與銀、銅、鈷等金屬離子成鹽，不同的磺胺藥物與硫酸銅反應可生成不同顏色的銅鹽沉淀，常用于本類藥物的鑒別。
☆ ☆考點2：碘胺類藥物的鑒別試驗
1．重氮化-偶合反應
具有芳伯氨基的本類藥物，可用重氮化-偶合反應鑒別。此反應收載在《中國藥典》附錄“一般鑒別試驗”項下，稱為“芳香第一胺類”鑒別反應。鑒別方法為：取供試品約50mg，加稀鹽酸1ml，加0.1mol/L亞硝酸鈉溶液數(shù)滴，滴加堿性β-萘酚試液數(shù)滴，生成橙黃色至猩紅色沉淀。反應方程式為：
磺胺嘧啶和磺胺甲 唑均有芳伯氨基，所以均使用此反應進行鑒別。
2．與硫酸銅的成鹽反應
本類藥物磺酰胺基上的氫原子比較活潑，具有酸性，可以和金屬離子（如Cu2+、Ag+、CO2+等）生成難溶性沉淀。其中與硫酸銅的反應常用于本類藥物的鑒別，反應如下：
如磺胺甲 唑的鑒別方法為：取本品約0.1g，加水與0.4%氫氧化鈉溶液各3ml，振搖使溶解，濾過，取濾液，加硫酸銅試液1滴，即生成草綠色沉淀。
磺胺嘧啶采用相同的方法試驗，生成黃綠色沉淀，放置后變?yōu)樽仙?BR> 3．紅外光譜法
本類藥物數(shù)量較多，又都具有共同的母核，為區(qū)別不同的磺胺藥物，《中國藥典》收載有紅外分光光度法鑒別本類藥物。其中磺胺嘧啶的特征峰有：
磺胺甲 唑的特征峰有：
☆ ☆☆☆☆考點3：磺胺類藥物的含量測定
1．磺胺甲 唑和磺胺嘧啶的含量測定
磺胺嘧啶、磺胺甲 唑具有芳伯氨基，《中國藥典》使用亞硝酸鈉滴定法測定含量。如磺胺甲 唑的測定方法為：取本品約0.5g，精密稱定，加鹽酸溶液（1→2）25ml溶解后，再加水25ml，照永停滴定法，用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，每1ml的亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）相當于25.33mg的C10H11N3O3S。
本法在鹽酸酸性條件下進行，使用亞硝酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定。為加快滴定反應的速度，滴定前要加入溴化鉀2g作為催化劑。為避免亞硝酸鈉在酸性條件下形成的亞硝酸揮發(fā)和分解，滴定時應將滴定管尖端插入液面下2/3處，用亞硝酸鈉滴定液迅速滴定，隨滴隨攪拌，至近終點時，將滴定管尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，繼續(xù)緩緩滴定至終點?！吨袊幍洹酚糜劳５味ǚù_定終點。終點前，電路上無電流通過，電流計指針指在零點。終點時，溶液中有了微量過量的亞硝酸，HNO2及其分解產(chǎn)物NO為可逆電對，在電極上可發(fā)生氧化還原反應，電路中有電流通過，致使電流計指針突然偏轉(zhuǎn)，不再回復，而指示終點。
《中國藥典》收載的磺胺嘧啶、磺胺甲 唑以及大多數(shù)磺胺類藥物及其普通制劑，均采用本法測定含量。
2．復方磺胺制劑的含量測定
（1）復方磺胺甲 唑片的含量測定?；前芳?唑（SMZ）、甲氧芐啶（TMP）和制劑的紫外吸收光譜見下圖：
從上圖a可以看出，SMZ在257nm有吸收，若在257nm處測定含量，由于TMP在257nm也有吸收，可干擾測定。若以257nm作為測定波長（λ2），根據(jù)TMP在304nm有等吸收，選擇304nm作為參比波長（λ1），將供試品在此二波長的吸收度之差（△A）作為定量的依據(jù)，可消除TMP的干擾?！鰽與C（SMZ）有線性關(guān)系，可以用對照品比較法測定其含量。
《中國藥典》復方磺胺甲 唑片中磺胺甲 唑的含量測定方法為：取本品10片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于磺胺甲 唑50mg），置100ml量瓶中，加乙醇適量，振搖15分鐘使磺胺甲 唑溶解，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液；另精密稱取在105℃干燥至恒重的磺胺甲 唑?qū)φ掌?0mg與甲氧芐啶對照品10mg，分別置100ml量瓶中，各加乙醇溶解并稀釋至刻度，作為對照品溶液（1）和對照品溶液（2）。精密量取供試品溶液及對照品溶液（1）、（2）各2ml，分置100ml量瓶中，各加0.4%氫氧化鈉溶液稀釋至刻度，照分光光度法，取對照品溶液（2）的稀釋液，以257nm為測定波長（λ2），在304nm波長附近（每間隔0.5nm）選擇等吸收點波長作為參比波長（λ1），要求△A= Aλ2- Aλ1=0，再在λ2與λ1處分別測定供試品溶液的稀釋液和對照品溶液（1）的稀釋液的吸收度，求出各自的△A，計算，即得。
含量測定結(jié)果的計算公式為：
式中，△AX和△AR--供試品溶液的稀釋液和對照品溶液（1）的稀釋液的吸收度差值；CR--SMZ對照品的稱樣量，g；W和 --片粉的稱樣量和平均片重，g。由于供試品溶液和對照品溶液是在完全平行的條件下測定的，所以稀釋的倍數(shù)可以不考慮。
TMP的測定是以鹽酸-氯化鉀溶液為溶劑，以239nm作為測定波長（λ2），用SMZ對照液的稀釋液在295nm附近選擇等吸收波長作為參比波長（λ1），見上圖b，分別取供試品溶液和TMP對照品溶液，在測定波長（λ2）和參比波長（λ1）處測定吸收度，計算，即得。
（2）復方磺胺嘧啶片的含量測定?；前粪奏ぃ⊿D）的吸收波長為308nm，此波長處TMP無吸收，所以可直接測定SD的含量，見下圖中的1處。
方法為：取本品10片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于磺胺嘧啶0.2g）置100ml量瓶中，加0.4%氫氧化鈉溶液適量，振搖使磺胺嘧啶溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液2ml，置另一100ml量瓶中，加鹽酸溶液（9→1000）稀釋至刻度，照分光光度法，在308nm的波長處測定吸收度；另取105℃干燥至恒重的磺胺嘧啶對照品適量，精密稱定，加鹽酸溶液（9→1000）溶解并定量稀釋制成每1ml中約含40μg的溶液，同法測定，計算，即得。
本法為對照品比較法，含量測定結(jié)果的計算公式為：
式中，AX和AR--供試品溶液和對照品溶液的吸收度，CR--對照品溶液的濃度，μg/ml；W--稱樣量，g； --平均片重，g。
由于SD對TMP的測定有干擾，所以采用雙波長分光光度法測定TMP含量。先用醋酸提出TMP，SD僅部分被提出，用鹽酸溶液（9→1000）稀釋后，以308.0nm作為參比波長（λ1），再在277.4nm附近，用SD對照品溶液的稀釋液選擇等吸收點，作為測定波長（λ2），見上圖中的2處。分別取供試品溶液和TMP對照品溶液，在測定波長（λ2）和參比波長（λ1）處測定吸收度，計算，即得。