(一)電解質
抗原與抗體發(fā)生結合后,由親水膠體變?yōu)槭杷z體的過程中,須有電解質參與才能進一步使抗原抗體復合物表面失去電荷,水化層破壞,復合物相互靠攏聚集形成大塊的凝集或沉淀。若無電解質參加,則不出現(xiàn)可見反應。為了促使沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%~0.9%(人、畜)或8%~10%(禽)的氯化鈉或各種緩沖液(免疫標記技術)作為抗原和抗體的稀釋液或反應液。但電解質的濃度不宜過高,否則會出現(xiàn)鹽析現(xiàn)象。
(二)溫度
在一定溫度范圍內,溫度越高,抗原、抗體分子運動速度越快,這可以增加其碰撞的機會,加速抗原抗體結合和反應現(xiàn)象的出現(xiàn),如凝集和沉淀反應通常在37℃水浴感作(即將試驗材料加蓋保濕恒溫作用)一定時間,以促進反應現(xiàn)象的出現(xiàn),若用56℃水浴則反應更快。但有的抗原抗體結合則需長時間在低溫下,才能使反應完成的比較充分、徹底,如有的補體結合試驗在0℃~4℃冰箱結合效果更好。
(三)酸堿度
血清學試驗要求在一定的pH下進行,常用的pH值為6~8,過高或過低,均可使已結合的抗原抗體復合物重新解離。若pH降至抗原或抗體的等電點時,會發(fā)生非特異性的酸凝集,造成假象。
(四)振蕩
適當的機械振蕩能增加分子或顆粒間的相互碰撞,加速抗原抗體的結合反應,但強烈的振蕩可使抗原抗體復合物解離。
(五)雜質和異物
試驗介質中如有與反應無關的雜質、異物(如蛋白質、類脂質、多糖等物質)存在時,會抑制反應的進行或引起非特異性反應,故每批血清學試驗都應設陽性對照和陰性對照試驗。
抗原與抗體發(fā)生結合后,由親水膠體變?yōu)槭杷z體的過程中,須有電解質參與才能進一步使抗原抗體復合物表面失去電荷,水化層破壞,復合物相互靠攏聚集形成大塊的凝集或沉淀。若無電解質參加,則不出現(xiàn)可見反應。為了促使沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%~0.9%(人、畜)或8%~10%(禽)的氯化鈉或各種緩沖液(免疫標記技術)作為抗原和抗體的稀釋液或反應液。但電解質的濃度不宜過高,否則會出現(xiàn)鹽析現(xiàn)象。
(二)溫度
在一定溫度范圍內,溫度越高,抗原、抗體分子運動速度越快,這可以增加其碰撞的機會,加速抗原抗體結合和反應現(xiàn)象的出現(xiàn),如凝集和沉淀反應通常在37℃水浴感作(即將試驗材料加蓋保濕恒溫作用)一定時間,以促進反應現(xiàn)象的出現(xiàn),若用56℃水浴則反應更快。但有的抗原抗體結合則需長時間在低溫下,才能使反應完成的比較充分、徹底,如有的補體結合試驗在0℃~4℃冰箱結合效果更好。
(三)酸堿度
血清學試驗要求在一定的pH下進行,常用的pH值為6~8,過高或過低,均可使已結合的抗原抗體復合物重新解離。若pH降至抗原或抗體的等電點時,會發(fā)生非特異性的酸凝集,造成假象。
(四)振蕩
適當的機械振蕩能增加分子或顆粒間的相互碰撞,加速抗原抗體的結合反應,但強烈的振蕩可使抗原抗體復合物解離。
(五)雜質和異物
試驗介質中如有與反應無關的雜質、異物(如蛋白質、類脂質、多糖等物質)存在時,會抑制反應的進行或引起非特異性反應,故每批血清學試驗都應設陽性對照和陰性對照試驗。