高二下冊生物菊花的組織培養(yǎng)實驗操作知識點

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(一)制備MS固體培養(yǎng)基
    1、配置各種母液
    2、配置培養(yǎng)基①定容② 調(diào)PH
    ③培養(yǎng)基的分裝3、滅菌分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進行高壓蒸汽滅菌
    1、選材:菊花莖段,取生長旺盛的嫩枝
    (二)外植體消毒
    2、消毒:
    流水沖洗—酒精—無菌水沖洗—氯化汞—無菌水沖洗至少三次之上
    (三)接種
    用70%的酒精噴霧使空氣消毒, 酒精或新潔爾滅搽洗工作臺并用紫外線照射20分鐘
    1、接種室消毒
    2、無菌操作要求
    操作要在酒精燈火焰旁完成,每次使用器械后,都需要用火焰灼燒滅菌,接種后立即蓋好瓶蓋。
    3、材料的切取和接種
    4、接種注意事項
    ①每接種一塊外植體前,鑷子需放入體積分數(shù)為75%的酒精溶液中消毒一次,然后在酒精燈火焰上燒一遍,冷卻后再接種
    ②外植體在培養(yǎng)基中要分布均勻,放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定,一般胡蘿卜3-4塊,菊的莖或葉6-8塊,也不要太少,以充分利用培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分和光照條件
    ③插入時應(yīng)注意方向,不要倒插。莖段、莖尖基部插入培養(yǎng)基利于吸收水分和養(yǎng)分
    (四)培養(yǎng)
    無菌箱中培養(yǎng),定期消毒,保持適宜的溫度,光照
    (五)移栽
    1、打開封口膜
    2、清洗轉(zhuǎn)移至消過毒的蛭石或珍珠巖中幼苗長壯后,移栽到土壤中