微生物學(xué)理論指導(dǎo):過(guò)濾滅菌

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可供過(guò)濾滅菌使用的濾膜很多,其材料多為(PES)、尼龍、多聚碳酸鹽、醋酸纖維素、硝酸纖維素、PTFE、陶瓷等。一般情況下采取正壓過(guò)濾,正壓過(guò)濾較之負(fù)壓過(guò)濾具有流速高、過(guò)濾快、不易污染,可避免蛋白質(zhì)產(chǎn)生大量氣泡等優(yōu)點(diǎn)。一般使用過(guò)濾器可參照各供應(yīng)商的產(chǎn)品說(shuō)明書。
    目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室和制藥企業(yè)采用微孔濾膜濾器(如Zeiss濾器)或立式微孔濾器(Millipore、Pall)除菌。微孔濾膜濾器為不銹鋼,中間可夾放0.22um濾膜。使用這種濾器最重要步驟是安裝濾膜及無(wú)菌過(guò)濾過(guò)程。如在使用Zeiss濾器時(shí),先要用培養(yǎng)用水將濾膜充分潤(rùn)濕,在安裝濾膜時(shí)可在其上放置一層定性濾紙?jiān)俟潭?。消毒時(shí)旋鈕不要扭太緊,凡與空氣接觸部位都要包好(可用牛皮紙、紗布、無(wú)紡布等);高壓滅菌后,在無(wú)菌環(huán)境中立即將旋鈕扭緊。過(guò)濾除菌結(jié)束后,要打開濾器,檢查濾膜是否完整,如果濾膜破裂,需重新進(jìn)行過(guò)濾除菌過(guò)程。立式微孔濾器可以選用不同的微孔濾柱體積,因?yàn)闉V膜的折疊,膜面積顯著增大,液體處理量大,而且不容易發(fā)生堵塞現(xiàn)象。