單向擴散試驗：瓊脂內(nèi)混入抗體，待測抗原從局部向瓊脂內(nèi)自由擴散，如抗原和相應抗體結合，則形成沉淀環(huán)。
1、試管法：將一定量的抗體混入0.7%瓊脂糖溶液中，注入小試管內(nèi)，上層加抗原溶液使待測抗原在凝膠中自由擴散，在抗原抗體比例恰當位置形成沉淀環(huán)。
2、平板法：是將抗體或抗血清混入0.9%瓊脂糖內(nèi)，未凝固前傾注成平板，然后在上打孔，將抗原加入孔中，放37℃讓其自由擴散，24～48h后可見孔周圍出現(xiàn)沉淀環(huán)，測定環(huán)的直徑或面積計算標本中待測抗原的濃度。有兩種計算方法：l）Mancini曲線：適用大分子抗原的和長時間擴散（>48h）的結果，沉淀環(huán)直徑的平方與抗原濃度呈線性關系c/d2=k.（其中c為抗原濃度 d為沉淀環(huán)直徑 k為常數(shù)）
3、單向擴散試驗檢測時的注意點：
（1）抗血清必須特異性強、效價高、親和力強，在良好條件下保存。
（2）每次測定都必須作標準曲線。
（3）每次測定時必須用質控血清作質控。
（4）注意雙環(huán)現(xiàn)象（出現(xiàn)了兩種抗原性相同成分）。
（5）應用單克隆抗體測量多態(tài)性抗原時，測定值偏低；用多克隆抗體測量單克隆病時，測定值偏高。
1、試管法：將一定量的抗體混入0.7%瓊脂糖溶液中，注入小試管內(nèi)，上層加抗原溶液使待測抗原在凝膠中自由擴散，在抗原抗體比例恰當位置形成沉淀環(huán)。
2、平板法：是將抗體或抗血清混入0.9%瓊脂糖內(nèi)，未凝固前傾注成平板，然后在上打孔，將抗原加入孔中，放37℃讓其自由擴散，24～48h后可見孔周圍出現(xiàn)沉淀環(huán)，測定環(huán)的直徑或面積計算標本中待測抗原的濃度。有兩種計算方法：l）Mancini曲線：適用大分子抗原的和長時間擴散（>48h）的結果，沉淀環(huán)直徑的平方與抗原濃度呈線性關系c/d2=k.（其中c為抗原濃度 d為沉淀環(huán)直徑 k為常數(shù)）
3、單向擴散試驗檢測時的注意點：
（1）抗血清必須特異性強、效價高、親和力強，在良好條件下保存。
（2）每次測定都必須作標準曲線。
（3）每次測定時必須用質控血清作質控。
（4）注意雙環(huán)現(xiàn)象（出現(xiàn)了兩種抗原性相同成分）。
（5）應用單克隆抗體測量多態(tài)性抗原時，測定值偏低；用多克隆抗體測量單克隆病時，測定值偏高。