原位雜交的特點是雜交在顯微鏡載玻片上中期染色體標本上進行。所謂原位即指標本上DNA原位變性,在利用放射性或非放射性標記的已知核酸探針雜交后,通過放射自顯影或非放射性檢測體系來檢測染色體上特異DNA或RNA順序,可用放射性顆粒在某條染色體的區(qū)帶出現的頻率或熒光的強弱來確定探針的位置,從而進行準確的基因定位。表明用此法將胰島素基因定位于11p15.但原位雜交必須在已知探針的情況下方可進行,而在未知致病基因時,則無法進行基因定位。
放射性同位素標記核酸探針與染色體顯帶結合進行原位雜交仍有不少缺點和局限性。例如需要使用放射性同位素的特殊實驗室,自顯影曝光時間長,同位素標記的探針不易保存,放射污染不利健康,特別是高質量的中期染色體標本在細胞培養(yǎng)基礎上難以得到,觀察費時,對間期核的研究難以進行等。
放射性同位素標記核酸探針與染色體顯帶結合進行原位雜交仍有不少缺點和局限性。例如需要使用放射性同位素的特殊實驗室,自顯影曝光時間長,同位素標記的探針不易保存,放射污染不利健康,特別是高質量的中期染色體標本在細胞培養(yǎng)基礎上難以得到,觀察費時,對間期核的研究難以進行等。

