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DNA變性及其應(yīng)用:
(1)DNA變性和復(fù)性的概念
在極端的pH值(加酸和堿)和受熱條件下,DNA分子中雙鏈間的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開,這就是DNA的變性。DNA的酸、堿變性與DNA熱變性有所不同。DNA的熱變性又稱為DNA的解鏈或融解作用。在DNA熱變性過程中,使紫外吸收達(dá)到增值50%時的溫度稱為解鏈溫度,又稱融解溫度(Tm)。Tm與DNA分子G+C量有關(guān)。復(fù)性指的是核酸雙鏈分子中分開的兩股單鏈重新結(jié)合。
(2)核酸雜交
如果將不同的DNA鏈放在同一溶液中作變性處理,只要某些有形成堿基配對的可能,它們之間就可形成局部雙鏈,這一過程稱為核酸雜交,生成的雙鏈為雜化雙鏈。還有一種核酸探針技術(shù),采用一小片段核苷酸單鏈,用放射性核素或生物素等化學(xué)發(fā)光物質(zhì)標(biāo)記,就可以作為探針進(jìn)行核酸雜交研究。
DNA變性及其應(yīng)用:
(1)DNA變性和復(fù)性的概念
在極端的pH值(加酸和堿)和受熱條件下,DNA分子中雙鏈間的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開,這就是DNA的變性。DNA的酸、堿變性與DNA熱變性有所不同。DNA的熱變性又稱為DNA的解鏈或融解作用。在DNA熱變性過程中,使紫外吸收達(dá)到增值50%時的溫度稱為解鏈溫度,又稱融解溫度(Tm)。Tm與DNA分子G+C量有關(guān)。復(fù)性指的是核酸雙鏈分子中分開的兩股單鏈重新結(jié)合。
(2)核酸雜交
如果將不同的DNA鏈放在同一溶液中作變性處理,只要某些有形成堿基配對的可能,它們之間就可形成局部雙鏈,這一過程稱為核酸雜交,生成的雙鏈為雜化雙鏈。還有一種核酸探針技術(shù),采用一小片段核苷酸單鏈,用放射性核素或生物素等化學(xué)發(fā)光物質(zhì)標(biāo)記,就可以作為探針進(jìn)行核酸雜交研究。