【摘要】 目的 通過測定殺菌濃度和最低抑菌濃度觀察抗菌納米材料對病原菌大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌和白色念珠菌的抗菌效果。方法 試管稀釋法。結(jié)果 抗菌納米材料對大腸桿菌，金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌的MBC在108 cfu/ml以上，對白色念珠菌為105 cfu/ml以上。抗菌納米材料S1、S2和CuO粉對4種病原菌的MIC為1.0%以下,其中S1的效果較好，MIC均<0.5%。ZnO粉對大腸桿菌的MIC為1.0%，其余均達(dá)到2.0%。 結(jié)論 抗菌納米材料對病原菌抗菌作用明確，具有一定的抗菌譜、其敏感性也較好。作為一類新型抗菌材料在臨床醫(yī)學(xué)中具有應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】 納米抗菌材料;殺菌濃度(MBC);最低抑菌濃度（MIC）
抗菌納米材料是在納米技術(shù)出現(xiàn)后產(chǎn)生的一類新型具有抗菌功能的材料。與傳統(tǒng)抗菌劑相比具有安全、耐久、不會產(chǎn)生耐藥性和廣譜等優(yōu)點(diǎn)。近年來，已有許多具有抗菌作用的納米材料應(yīng)用于紡織、醫(yī)學(xué)、衛(wèi)生制品等行業(yè)［1～3］。為觀察抗菌納米材料對病原菌的抗菌效果，本試驗(yàn)選用4種抗菌納米材料作為抗菌劑進(jìn)行了殺菌濃度和最低抑菌濃度的測定，并對其抗菌能力進(jìn)行了初步探討，現(xiàn)報告如下。
1 材料與方法
1. 1 抗菌納米材料和抗菌劑的制備 抗菌納米材料為納米無機(jī)抗菌材料S1、S2，納米ZnO粉和CuO粉。用普通營養(yǎng)液體培養(yǎng)基配制成2.0%的混懸液,對倍稀釋成1.0%、 0.5%、0.25%和0.125% 共5個濃度的混懸液作為抗菌劑。高壓滅菌后取1.8ml分裝試管。白色念珠菌用沙氏液體培養(yǎng)基制備。
1.2 受試菌株和菌液制備 受試菌株為本室保存大腸桿菌（ATCC25922）,金黃色葡萄球菌（ATCC26112）、綠膿假單胞菌（ATCC17504）和白色念珠菌（ATCC90029）。細(xì)菌純化培養(yǎng)后接種普通營養(yǎng)液體培養(yǎng)基，經(jīng)計數(shù)制成109cfu/ml的菌液。并以對倍稀釋法稀釋成108、107、106 cfu/ml共4個濃度作為受試菌液。白色念珠菌以沙氏液體培養(yǎng)基制備成106、105、104cfu/ml的菌液。
1. 3 殺菌濃度（MBC）測定 取各濃度菌液0.2ml接種至1.8ml 2.0%濃度的抗菌劑及未加抗菌納米材料作為對照的培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)作用24h后畫線接種普通營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)觀察判斷抗菌劑對不同濃度病原菌的殺菌濃度。
1．4 最低抑菌濃度（MIC）的測定 取各濃度抗菌劑1.8ml接種0.2ml其殺菌濃度的菌液及未加抗菌納米材料的培養(yǎng)基中37℃培養(yǎng)作用24h后挑取培育物接種普通營養(yǎng)瓊脂平板再次培養(yǎng)24h，經(jīng)畫線接種平板觀察確定各抗菌劑的最低抑菌濃度。
2 結(jié)果
2．1 抗菌劑對病原菌殺菌濃度的測定結(jié)果 。
2．2 抗菌劑對病原菌最低抑菌濃度的測定結(jié)果。 抗菌劑對病原菌MBC的測定結(jié)果 抗菌劑對病原菌MIC的測定結(jié)果
3 討論
本試驗(yàn)使用的病原菌為標(biāo)準(zhǔn)菌株，抗菌納米材料經(jīng)電子顯微鏡觀察和測量其微粒粒徑，達(dá)到納米尺寸，符合試驗(yàn)要求。試驗(yàn)使用2.0%濃度的抗菌劑對病原菌進(jìn)行殺菌濃度的測定結(jié)果中，4種抗菌劑對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和綠膿假單胞菌的MBC都在108cfu/ml以上，對真菌白色念珠菌在105 cfu/ml以上。在最低抑菌濃度的測定中，抗菌劑S1、S2和CuO粉對4種病原菌的MIC為1.0%以下,其中S1的效果較好，其MIC均<0.5%。ZnO對大腸桿菌的MIC為1.0%，其他均達(dá)到2.0%。抗菌劑S1、S2和CuO對綠膿假單胞菌和白色念珠菌的MIC為1.0%以下。結(jié)果表明抗菌納米材料對病原菌的抗菌作用比較明確，具有一定的抗菌譜，其敏感性也較好。同時也可看出不同抗菌納米材料對不同病原菌的抗菌能力也存在差異、對綠膿假單胞菌和白色念珠菌作用較為有限。ZnO的抗菌能力在其含量達(dá)2.0%時才能對金黃色葡萄球菌，綠膿假單胞菌和白色念珠菌起作用。提示抗菌納米材料在實(shí)際應(yīng)用中應(yīng)當(dāng)注意種類的選擇，添加的量和使用范圍。
自德國物理學(xué)家Gleiter在1984年成功地研制納米材料以來目前已開發(fā)出許多具有抗菌、除臭、消毒和保健功能的納米材料。為評價抗菌納米材料對病原菌的抑制/殺死效果，我們選擇4種抗菌納米材料作為抗菌劑對病原菌大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌和白色念珠菌進(jìn)行了殺菌濃度和最低抑菌濃度的測定，為在以后的臨床醫(yī)學(xué)應(yīng)用中提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【參考文獻(xiàn)】
1 忻賽君.納米抗菌織物的開發(fā)及抗菌性能研究.上海紡織科技,2005，33（1）：31-32.
2 朱菁,張美鈺.潔悠神長效抗菌劑用于激光術(shù)后創(chuàng)面的觀察.應(yīng)用激光,2002，22（4）：443-446.
3 劉維良,陳汴錕.納米抗菌粉體的制備與應(yīng)用研究.江蘇陶瓷,2002,35（1）:23-25.
4 虞功清,趙林.抗菌納米材料的電鏡觀察.中華醫(yī)學(xué)研究雜志,2004，4（12）：385-386.
5 林冠發(fā),王云芳.納米材料及技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用.咸陽師范學(xué)院學(xué)報,2002，17（4）：31-34.
【關(guān)鍵詞】 納米抗菌材料;殺菌濃度(MBC);最低抑菌濃度（MIC）
抗菌納米材料是在納米技術(shù)出現(xiàn)后產(chǎn)生的一類新型具有抗菌功能的材料。與傳統(tǒng)抗菌劑相比具有安全、耐久、不會產(chǎn)生耐藥性和廣譜等優(yōu)點(diǎn)。近年來，已有許多具有抗菌作用的納米材料應(yīng)用于紡織、醫(yī)學(xué)、衛(wèi)生制品等行業(yè)［1～3］。為觀察抗菌納米材料對病原菌的抗菌效果，本試驗(yàn)選用4種抗菌納米材料作為抗菌劑進(jìn)行了殺菌濃度和最低抑菌濃度的測定，并對其抗菌能力進(jìn)行了初步探討，現(xiàn)報告如下。
1 材料與方法
1. 1 抗菌納米材料和抗菌劑的制備 抗菌納米材料為納米無機(jī)抗菌材料S1、S2，納米ZnO粉和CuO粉。用普通營養(yǎng)液體培養(yǎng)基配制成2.0%的混懸液,對倍稀釋成1.0%、 0.5%、0.25%和0.125% 共5個濃度的混懸液作為抗菌劑。高壓滅菌后取1.8ml分裝試管。白色念珠菌用沙氏液體培養(yǎng)基制備。
1.2 受試菌株和菌液制備 受試菌株為本室保存大腸桿菌（ATCC25922）,金黃色葡萄球菌（ATCC26112）、綠膿假單胞菌（ATCC17504）和白色念珠菌（ATCC90029）。細(xì)菌純化培養(yǎng)后接種普通營養(yǎng)液體培養(yǎng)基，經(jīng)計數(shù)制成109cfu/ml的菌液。并以對倍稀釋法稀釋成108、107、106 cfu/ml共4個濃度作為受試菌液。白色念珠菌以沙氏液體培養(yǎng)基制備成106、105、104cfu/ml的菌液。
1. 3 殺菌濃度（MBC）測定 取各濃度菌液0.2ml接種至1.8ml 2.0%濃度的抗菌劑及未加抗菌納米材料作為對照的培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)作用24h后畫線接種普通營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)觀察判斷抗菌劑對不同濃度病原菌的殺菌濃度。
1．4 最低抑菌濃度（MIC）的測定 取各濃度抗菌劑1.8ml接種0.2ml其殺菌濃度的菌液及未加抗菌納米材料的培養(yǎng)基中37℃培養(yǎng)作用24h后挑取培育物接種普通營養(yǎng)瓊脂平板再次培養(yǎng)24h，經(jīng)畫線接種平板觀察確定各抗菌劑的最低抑菌濃度。
2 結(jié)果
2．1 抗菌劑對病原菌殺菌濃度的測定結(jié)果 。
2．2 抗菌劑對病原菌最低抑菌濃度的測定結(jié)果。 抗菌劑對病原菌MBC的測定結(jié)果 抗菌劑對病原菌MIC的測定結(jié)果
3 討論
本試驗(yàn)使用的病原菌為標(biāo)準(zhǔn)菌株，抗菌納米材料經(jīng)電子顯微鏡觀察和測量其微粒粒徑，達(dá)到納米尺寸，符合試驗(yàn)要求。試驗(yàn)使用2.0%濃度的抗菌劑對病原菌進(jìn)行殺菌濃度的測定結(jié)果中，4種抗菌劑對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和綠膿假單胞菌的MBC都在108cfu/ml以上，對真菌白色念珠菌在105 cfu/ml以上。在最低抑菌濃度的測定中，抗菌劑S1、S2和CuO粉對4種病原菌的MIC為1.0%以下,其中S1的效果較好，其MIC均<0.5%。ZnO對大腸桿菌的MIC為1.0%，其他均達(dá)到2.0%。抗菌劑S1、S2和CuO對綠膿假單胞菌和白色念珠菌的MIC為1.0%以下。結(jié)果表明抗菌納米材料對病原菌的抗菌作用比較明確，具有一定的抗菌譜，其敏感性也較好。同時也可看出不同抗菌納米材料對不同病原菌的抗菌能力也存在差異、對綠膿假單胞菌和白色念珠菌作用較為有限。ZnO的抗菌能力在其含量達(dá)2.0%時才能對金黃色葡萄球菌，綠膿假單胞菌和白色念珠菌起作用。提示抗菌納米材料在實(shí)際應(yīng)用中應(yīng)當(dāng)注意種類的選擇，添加的量和使用范圍。
自德國物理學(xué)家Gleiter在1984年成功地研制納米材料以來目前已開發(fā)出許多具有抗菌、除臭、消毒和保健功能的納米材料。為評價抗菌納米材料對病原菌的抑制/殺死效果，我們選擇4種抗菌納米材料作為抗菌劑對病原菌大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌和白色念珠菌進(jìn)行了殺菌濃度和最低抑菌濃度的測定，為在以后的臨床醫(yī)學(xué)應(yīng)用中提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【參考文獻(xiàn)】
1 忻賽君.納米抗菌織物的開發(fā)及抗菌性能研究.上海紡織科技,2005，33（1）：31-32.
2 朱菁,張美鈺.潔悠神長效抗菌劑用于激光術(shù)后創(chuàng)面的觀察.應(yīng)用激光,2002，22（4）：443-446.
3 劉維良,陳汴錕.納米抗菌粉體的制備與應(yīng)用研究.江蘇陶瓷,2002,35（1）:23-25.
4 虞功清,趙林.抗菌納米材料的電鏡觀察.中華醫(yī)學(xué)研究雜志,2004，4（12）：385-386.
5 林冠發(fā),王云芳.納米材料及技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用.咸陽師范學(xué)院學(xué)報,2002，17（4）：31-34.