執(zhí)業(yè)中藥師藥劑學(xué)輔導(dǎo):檢查熱原的方法

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1.家兔發(fā)熱試驗(yàn)
    將一定量的供試品,靜脈注入家兔體內(nèi),在規(guī)定時(shí)間內(nèi),觀察家兔體溫升高的情況,以判定供試品中所含熱原的限度是否符合規(guī)定的方法。具體工作、環(huán)境、家兔的條件及操作方法,應(yīng)嚴(yán)格按《中國(guó)藥典》1995年版熱原檢查項(xiàng)下規(guī)定執(zhí)行。
    2.鱟試驗(yàn)法
    本法利用一種低溫海洋動(dòng)物-鱟的血細(xì)胞(變形細(xì)胞)溶解物(又稱鱟試劑)與微量細(xì)菌內(nèi)毒素或熱原發(fā)生凝膠反應(yīng),從而檢測(cè)微量的內(nèi)毒素或熱原的一種實(shí)驗(yàn)技術(shù)。該法實(shí)質(zhì)上是一種酶反應(yīng),因?yàn)轺c血細(xì)胞中含有一種高分子量的凝固酶原和一種可凝固蛋白原,前者經(jīng)內(nèi)毒素(即熱原)激活轉(zhuǎn)化成具有活性的凝固酶,通過(guò)酶解作用,使凝固蛋白原轉(zhuǎn)變成凝固蛋白,凝固蛋白又經(jīng)過(guò)交聯(lián)酶的作用相互聚合形成凝膠。
    膠凝的速度與內(nèi)毒素濃度成正比。已知反應(yīng)的最適溫度為36℃~38℃,最適pH值為6~7.5.
    本法雖具有操作簡(jiǎn)便、迅速、靈敏度高(比兔法高10倍左右)等優(yōu)點(diǎn),但若操作不當(dāng),會(huì)出現(xiàn)一定數(shù)量的假陽(yáng)性反應(yīng),且尚未法定,一般多作預(yù)測(cè)和篩選試驗(yàn)之用,對(duì)革蘭陰性桿菌以外的內(nèi)毒素不敏感。