色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：用葡聚糖凝膠G- 10（40～120μm）為填充劑，玻璃柱內(nèi)徑1.3～1.6cm，柱高30～40cm；以pH7.0磷酸鹽緩沖溶液（0.1mol/L磷酸氫二鈉溶液- 0.1mol/L磷酸二氫鈉溶液）（61：39）為流動相A，以水為流動相B；流速為每分鐘1.5ml；檢測波長為254nm。理論板數(shù)按藍色葡聚糖 2000峰不低于700。青霉素V鉀片和青霉素V鉀膠囊的含量測定方法同青霉素V鉀。
文獻報道的方法：
丁紅雨等用HPLC法測定青霉素V鉀片的含量。儀器：JASCO PU-980型高效液相色譜儀。色譜柱：Diamonsil TM Cl8柱(5μm，4.6mm×150mm)；流動相：水-乙腈-冰醋酸(325：175：3.5)；檢測波長：254nm；流速：1.0mL/min。
王雁等用HPLC法測定青霉素V鉀片的含量。儀器：美國SSISERIES IV 雙泵高效液相色譜儀。固定相：ODS柱(4.6×250mm)；流動相：水-乙腈-冰醋酸(650：350：5.75)；流速：1.2ml/min；檢測波長：254nm。
另外，鄭建斌等用二次微分簡易示波伏安法測定青霉素V鉀的含量。
文獻報道的方法：
丁紅雨等用HPLC法測定青霉素V鉀片的含量。儀器：JASCO PU-980型高效液相色譜儀。色譜柱：Diamonsil TM Cl8柱(5μm，4.6mm×150mm)；流動相：水-乙腈-冰醋酸(325：175：3.5)；檢測波長：254nm；流速：1.0mL/min。
王雁等用HPLC法測定青霉素V鉀片的含量。儀器：美國SSISERIES IV 雙泵高效液相色譜儀。固定相：ODS柱(4.6×250mm)；流動相：水-乙腈-冰醋酸(650：350：5.75)；流速：1.2ml/min；檢測波長：254nm。
另外，鄭建斌等用二次微分簡易示波伏安法測定青霉素V鉀的含量。