(1)外標法:若標準曲線過原點,測定組分含量變化不大,可使用外標一點
法。由于中藥制劑中測定組分含量波動范圍較大,所以采用標準曲線定量。
(2)內(nèi)標法:中藥制劑組成復雜,若使用內(nèi)標法,會增加分離的難度,其組分很容易干擾內(nèi)標峰,所以中藥制劑含量測定中,當組成相對簡單,雜質(zhì)不干擾內(nèi)標峰時,才使用內(nèi)標法。
3.供試品溶液的制備 由于高效液相色譜法本身具有分離的功能,因此所用供試品一般經(jīng)提取制得,不在需要純化處理。但組成復雜的制劑,仍需采用萃取、柱色譜等預處理方法對供試品進行純化處理。
中藥制劑多含有糖,制備供試液時,宜使用高濃度的醇或其他有機溶劑提取測定組分,不使用水為溶劑,以免提出糖污染色譜柱,提取的方法視制劑的情況而定,可采用萃?。ㄓ糜谝后w制劑)、回流或超聲震蕩提取(固體制劑)等。
由于中藥制劑組成復雜,分析時應在分析柱前加預柱。分析完畢后一般用水或低濃度的醇水先洗去糖等水溶性雜質(zhì),再用甲醇等有機溶劑將色譜柱沖洗干凈。
示例桂枝茯苓丸中桂皮酸的含量測定。本品桂枝為君藥,采用高效液相色譜法測定其中桂皮酸的含量。
供試品的制備 精密稱取本品細粉約1g,置50ml量瓶中,加50%甲醇40ml,超聲震蕩提取30分鐘,放冷,加50%至刻度,離心10分鐘(1200r/min),取上清液用0.45μm的濾膜過濾,取續(xù)濾液備用。
對照品溶液的制備 精密稱取桂皮酸對照品適量,加50%甲醇定量稀釋成每ml中含0.01mg的溶液。
色譜條件 Inersil 5ODS-Ⅱ柱(25cm×4.6mm);流動相:乙腈-0.1%磷酸(29:71);檢測波長285nm;流速1.0ml/min。
用外標法測定其含量。
桂皮酸對照品和樣品的色譜圖見圖。
展望
中藥制劑質(zhì)量標準應該能夠說明質(zhì)量與療效,即療效與物質(zhì)基礎(chǔ)的關(guān)系,其分析檢測方法應包括理化指標、生物指標和療效指標。方法應簡便、快速,具有準確性和專屬性的特點。
只要有成品生產(chǎn)和銷售與使用,就需要有質(zhì)量標準的監(jiān)測和保證。
要改變目前我國研究制定中藥制劑質(zhì)量標準的工作起步較晚,基礎(chǔ)較差,工作難度較大的局面,對中藥制劑質(zhì)量工作重視與否,是開展中藥制劑質(zhì)控工作的前提;制定、完善、健全中藥制劑質(zhì)控標準,是進行中藥制劑質(zhì)量控制工作的依據(jù);增置,完善有關(guān)條件和措施及要求等則是加強和搞好中藥制劑質(zhì)量控制工作的基本保證。為此,必須不斷地應用現(xiàn)代科學研究成果,在高起點上制定中藥制劑的質(zhì)量標準,提高檢測技術(shù)水平,做到與國際接軌。
隨著中醫(yī)藥理論基礎(chǔ)研究的不斷深入,各種分析方法的進步,其總趨勢正向著儀器化、自動化、快速和微量的方向發(fā)展。
化學等價不等于生物等價,須進行體內(nèi)藥物分析,如血藥濃度、組織中的濃度、脲中的濃度和排泄量、藥物代謝以及中藥制劑在體內(nèi)可能輩實際利用的程度等方面,直接或間接地判斷療效,這也是進一步合理用藥及研制開發(fā)新藥,使中藥趨于現(xiàn)代化的標志之一。
法。由于中藥制劑中測定組分含量波動范圍較大,所以采用標準曲線定量。
(2)內(nèi)標法:中藥制劑組成復雜,若使用內(nèi)標法,會增加分離的難度,其組分很容易干擾內(nèi)標峰,所以中藥制劑含量測定中,當組成相對簡單,雜質(zhì)不干擾內(nèi)標峰時,才使用內(nèi)標法。
3.供試品溶液的制備 由于高效液相色譜法本身具有分離的功能,因此所用供試品一般經(jīng)提取制得,不在需要純化處理。但組成復雜的制劑,仍需采用萃取、柱色譜等預處理方法對供試品進行純化處理。
中藥制劑多含有糖,制備供試液時,宜使用高濃度的醇或其他有機溶劑提取測定組分,不使用水為溶劑,以免提出糖污染色譜柱,提取的方法視制劑的情況而定,可采用萃?。ㄓ糜谝后w制劑)、回流或超聲震蕩提取(固體制劑)等。
由于中藥制劑組成復雜,分析時應在分析柱前加預柱。分析完畢后一般用水或低濃度的醇水先洗去糖等水溶性雜質(zhì),再用甲醇等有機溶劑將色譜柱沖洗干凈。
示例桂枝茯苓丸中桂皮酸的含量測定。本品桂枝為君藥,采用高效液相色譜法測定其中桂皮酸的含量。
供試品的制備 精密稱取本品細粉約1g,置50ml量瓶中,加50%甲醇40ml,超聲震蕩提取30分鐘,放冷,加50%至刻度,離心10分鐘(1200r/min),取上清液用0.45μm的濾膜過濾,取續(xù)濾液備用。
對照品溶液的制備 精密稱取桂皮酸對照品適量,加50%甲醇定量稀釋成每ml中含0.01mg的溶液。
色譜條件 Inersil 5ODS-Ⅱ柱(25cm×4.6mm);流動相:乙腈-0.1%磷酸(29:71);檢測波長285nm;流速1.0ml/min。
用外標法測定其含量。
桂皮酸對照品和樣品的色譜圖見圖。
展望
中藥制劑質(zhì)量標準應該能夠說明質(zhì)量與療效,即療效與物質(zhì)基礎(chǔ)的關(guān)系,其分析檢測方法應包括理化指標、生物指標和療效指標。方法應簡便、快速,具有準確性和專屬性的特點。
只要有成品生產(chǎn)和銷售與使用,就需要有質(zhì)量標準的監(jiān)測和保證。
要改變目前我國研究制定中藥制劑質(zhì)量標準的工作起步較晚,基礎(chǔ)較差,工作難度較大的局面,對中藥制劑質(zhì)量工作重視與否,是開展中藥制劑質(zhì)控工作的前提;制定、完善、健全中藥制劑質(zhì)控標準,是進行中藥制劑質(zhì)量控制工作的依據(jù);增置,完善有關(guān)條件和措施及要求等則是加強和搞好中藥制劑質(zhì)量控制工作的基本保證。為此,必須不斷地應用現(xiàn)代科學研究成果,在高起點上制定中藥制劑的質(zhì)量標準,提高檢測技術(shù)水平,做到與國際接軌。
隨著中醫(yī)藥理論基礎(chǔ)研究的不斷深入,各種分析方法的進步,其總趨勢正向著儀器化、自動化、快速和微量的方向發(fā)展。
化學等價不等于生物等價,須進行體內(nèi)藥物分析,如血藥濃度、組織中的濃度、脲中的濃度和排泄量、藥物代謝以及中藥制劑在體內(nèi)可能輩實際利用的程度等方面,直接或間接地判斷療效,這也是進一步合理用藥及研制開發(fā)新藥,使中藥趨于現(xiàn)代化的標志之一。

