一、提取
黃酮苷和極性較大的苷元：甲醇，乙醇，甲醇-水（1：1），丙酮，乙酸乙酯。
多糖苷：沸水
花色苷：0.1%鹽酸進(jìn)行提取。
苷元：氯仿，乙醚，乙酸乙酯。
注意：苷類提取防止酶解。
（一）溶劑萃取法：自浸膏中先用乙醚萃取苷元，再用乙酸乙酯反復(fù)萃取苷，最后用正丁醇萃取極性較大的苷。
（二）堿提酸沉法
(1) 常用堿水：石灰水，Na2CO3，稀NaOH，堿性稀醇。
酸沉：鹽酸
注意：酸堿濃度不宜過高。
堿性過強(qiáng)，破壞黃酮母核；酸性過強(qiáng)，生成佯鹽，影響產(chǎn)率。
石灰水：可除去鞣質(zhì)，果膠，粘液質(zhì)，有利于純化。但浸出效果不及NaOH ，且有些黃酮可與鈣結(jié)合成不溶性沉淀。 稀NaOH：浸出效率高，但雜質(zhì)多。
二、分離方法
分離的基本依據(jù)：
極性差異、酸性強(qiáng)弱、分子大小和特殊結(jié)構(gòu)。
（一）柱色譜法
1、硅膠柱色譜法
適于分離異黃酮，二氫黃酮（醇）和高度甲基化或乙?；狞S酮及黃酮醇類。
分離苷元時(shí)：氯仿-甲醇混合溶劑洗脫。
分離苷時(shí)：氯仿-甲醇-水或乙酸乙酯-丙酮-水
2、聚酰胺柱色譜
適于黃酮類化合物的分離。
規(guī)律：
A：苷元相同時(shí)，以含水移動(dòng)相洗脫，被吸附的強(qiáng)弱順序?yàn)椋?苷元>單糖苷>雙糖苷>雙糖鍵苷。
B：與酚羥基的數(shù)目有關(guān)，數(shù)目越多，吸附力越強(qiáng)。與酚羥基的位置有關(guān)，如果酚羥基所處的位置易形成分子內(nèi)氫鍵，則吸附力減弱。
查耳酮>二氫黃酮， 黃酮>二氫黃酮
C：不同類型黃酮類化合物，被吸附的強(qiáng)弱順序?yàn)椋狐S酮醇>黃酮>二氫黃酮>異黃酮。
D：分子內(nèi)芳香化程度越高，共軛雙鍵越多，則吸附力越強(qiáng)。
3、葡聚糖凝膠色譜法
凝膠類型：Ssephadex LH-20和Sephadex G兩種類型的凝膠。
分離苷元時(shí)：利用吸附作用，游離酚羥基數(shù)目越多，則吸附力越強(qiáng)，越難洗脫。
分離苷時(shí)：主要靠分子篩，洗脫時(shí)按苷分子量由大到小的順序依次被洗脫出柱體。
黃酮類化合物 取代基 Ve/Vo
芹菜素 5，7，4‘-三羥基 5.3
木犀草素 5，7，3‘，4’-四羥基 6.3
槲皮素 3，5，7，3'，4'-五羥基 8.3
楊梅素 3，5，7，3‘，4’，5‘-六羥基 9.2
山柰酚-3-鼠李糖基 三糖苷 3.3
半乳糖-7-鼠李糖苷
槲皮素-3-蕓香糖苷 雙糖苷 4.0
槲皮素-3-鼠李糖苷 單糖苷 4.9
常用的洗脫劑：堿性水溶液，含鹽水溶液、醇及含水醇
（二）PH梯度法：用不同濃度的堿分離
（三）硼酸絡(luò)合法 具有鄰二酚羥基的黃酮類化合物可與硼酸絡(luò)合生成易溶于 水的化合物。
黃酮苷和極性較大的苷元：甲醇，乙醇，甲醇-水（1：1），丙酮，乙酸乙酯。
多糖苷：沸水
花色苷：0.1%鹽酸進(jìn)行提取。
苷元：氯仿，乙醚，乙酸乙酯。
注意：苷類提取防止酶解。
（一）溶劑萃取法：自浸膏中先用乙醚萃取苷元，再用乙酸乙酯反復(fù)萃取苷，最后用正丁醇萃取極性較大的苷。
（二）堿提酸沉法
(1) 常用堿水：石灰水，Na2CO3，稀NaOH，堿性稀醇。
酸沉：鹽酸
注意：酸堿濃度不宜過高。
堿性過強(qiáng)，破壞黃酮母核；酸性過強(qiáng)，生成佯鹽，影響產(chǎn)率。
石灰水：可除去鞣質(zhì)，果膠，粘液質(zhì)，有利于純化。但浸出效果不及NaOH ，且有些黃酮可與鈣結(jié)合成不溶性沉淀。 稀NaOH：浸出效率高，但雜質(zhì)多。
二、分離方法
分離的基本依據(jù)：
極性差異、酸性強(qiáng)弱、分子大小和特殊結(jié)構(gòu)。
（一）柱色譜法
1、硅膠柱色譜法
適于分離異黃酮，二氫黃酮（醇）和高度甲基化或乙?；狞S酮及黃酮醇類。
分離苷元時(shí)：氯仿-甲醇混合溶劑洗脫。
分離苷時(shí)：氯仿-甲醇-水或乙酸乙酯-丙酮-水
2、聚酰胺柱色譜
適于黃酮類化合物的分離。
規(guī)律：
A：苷元相同時(shí)，以含水移動(dòng)相洗脫，被吸附的強(qiáng)弱順序?yàn)椋?苷元>單糖苷>雙糖苷>雙糖鍵苷。
B：與酚羥基的數(shù)目有關(guān)，數(shù)目越多，吸附力越強(qiáng)。與酚羥基的位置有關(guān)，如果酚羥基所處的位置易形成分子內(nèi)氫鍵，則吸附力減弱。
查耳酮>二氫黃酮， 黃酮>二氫黃酮
C：不同類型黃酮類化合物，被吸附的強(qiáng)弱順序?yàn)椋狐S酮醇>黃酮>二氫黃酮>異黃酮。
D：分子內(nèi)芳香化程度越高，共軛雙鍵越多，則吸附力越強(qiáng)。
3、葡聚糖凝膠色譜法
凝膠類型：Ssephadex LH-20和Sephadex G兩種類型的凝膠。
分離苷元時(shí)：利用吸附作用，游離酚羥基數(shù)目越多，則吸附力越強(qiáng)，越難洗脫。
分離苷時(shí)：主要靠分子篩，洗脫時(shí)按苷分子量由大到小的順序依次被洗脫出柱體。
黃酮類化合物 取代基 Ve/Vo
芹菜素 5，7，4‘-三羥基 5.3
木犀草素 5，7，3‘，4’-四羥基 6.3
槲皮素 3，5，7，3'，4'-五羥基 8.3
楊梅素 3，5，7，3‘，4’，5‘-六羥基 9.2
山柰酚-3-鼠李糖基 三糖苷 3.3
半乳糖-7-鼠李糖苷
槲皮素-3-蕓香糖苷 雙糖苷 4.0
槲皮素-3-鼠李糖苷 單糖苷 4.9
常用的洗脫劑：堿性水溶液，含鹽水溶液、醇及含水醇
（二）PH梯度法：用不同濃度的堿分離
（三）硼酸絡(luò)合法 具有鄰二酚羥基的黃酮類化合物可與硼酸絡(luò)合生成易溶于 水的化合物。