臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師復習:生物化學(16)

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(1)DNA變性和復性的概念
    DNA變性(DNA denaturation):在極端的pH值(加酸或堿)和受熱條件下,DNA分子中雙鏈間的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開,這就是DNA的變性。依變性因素不同,有DNA的酸、堿變性,或DNA的熱變性之分。因為變性時堿基對之間的氫鍵斷開,相鄰堿基對之間的堆積力也受到破壞(但不伴有共價鍵斷裂),所以變性后的DNA在260nm的紫外光吸收增強,稱為高色效應(增色效應)。
    在DNA變性中以DNA的熱變性意義。DNA的熱變性又稱DNA的解鏈或融解作用。在DNA熱變性過程中,使紫外吸收達到增值50%時的溫度稱為解鏈溫度,又稱融解溫度(Tm)。Tm與DNA分子G+C量有關。
    變性后的DNA一級結構沒有改變。
    退火:熱變性DNA溶液經(jīng)緩慢冷卻,兩條解鏈的互補單鏈重新締合,恢復雙螺旋結構。
    變性DNA的復性:變性DNA經(jīng)退火恢復原狀的過程。
    低色效應(減色效應):伴隨復性,DNA溶液紫外吸收減弱。