艾滋病診斷檢查

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1、流行病學(xué)及臨床表現(xiàn)
    2、 實(shí)驗(yàn)室檢查
    (1) 主要是中度以上細(xì)胞免疫缺陷包括:CD4+T 淋巴細(xì)胞耗竭:T淋巴細(xì)胞功能下降,外周血淋巴細(xì)胞顯著減少,CD4<200/μl,CD4/CD8<1.0,(正常人為1.25~2.1),遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)皮試陰性,有絲分裂原刺激反應(yīng)低下。
    (2) B淋巴細(xì)胞功能失調(diào):多克隆性高球蛋白血癥,循環(huán)免疫復(fù)合物形成和自身抗體形成。
    (3) NK細(xì)胞活性下降
    (4)各種致病性感染的病原體檢查如PCR.組織學(xué)證實(shí)的惡性腫瘤,如KS;
    3、HIV抗體檢測(cè)
    (1)酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA);
    (2)明膠顆粒凝集試驗(yàn)(PA);
    (3)免疫熒光檢測(cè)法(IFA);
    (4)免疫印跡檢測(cè)法(Western Blot,簡(jiǎn)稱WB法);
    (5)放射免疫沉淀法(RIP)。
    其中前三項(xiàng)常用于篩選試驗(yàn),后二者用于確證試驗(yàn)。HIV感染后數(shù)周或數(shù)日內(nèi)常不能檢出抗體,95%的受染者在5個(gè)月內(nèi)可測(cè)出抗體。但也有感染后3-4年仍不能檢出抗體者,此時(shí)有必要檢測(cè)HIV病毒。
    4、PCR技術(shù)檢測(cè)HIV病毒
    PCR可用來(lái)追蹤HIV的自然感染史??稍谄渌鍖W(xué)和病毒學(xué)標(biāo)志出現(xiàn)前檢測(cè)病毒序列,這樣可判定無(wú)癥狀而且血清陰性患者潛在的HIV的傳播性;可用來(lái)監(jiān)測(cè)長(zhǎng)潛伏期(4~7年)病人,以及在抗病毒治療期間病毒的水平;也可用于HIV-1血清陽(yáng)性母親的嬰兒的HIV檢測(cè)。在嬰兒出生后最初的6~9個(gè)月期間,他們的血液中存在母體的抗體,因此用PCR可判定嬰兒是否真正被HIV感染。
    (1)血清抗體陽(yáng)性病人HIV序列的檢測(cè)
    有人從AIDS或ARC病人的外周血單核細(xì)胞培養(yǎng)物,精液細(xì)胞和精液上清制備DNA.然后用PCR法和逆轉(zhuǎn)錄酶測(cè)定法分別檢測(cè)HIV-1.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物與32P標(biāo)記的探針退火之后用BstNI消化。再進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳和自顯影。結(jié)果表明,在逆轉(zhuǎn)錄酶陰性的28個(gè)細(xì)胞系中有9個(gè)以及用逆轉(zhuǎn)錄酶法不能確定的9個(gè)細(xì)胞系中有2個(gè)為陽(yáng)性。這說(shuō)明過(guò)去許多細(xì)胞培養(yǎng)物認(rèn)為是陰性者,實(shí)際上用更敏感的PCR測(cè)定時(shí)則為陽(yáng)性。
    從血清陽(yáng)性的HIV感染者的外周血單核細(xì)胞中可檢測(cè)出前病毒序列。通過(guò)共培養(yǎng)分離出病毒的血清陽(yáng)性的同性戀男人血液制備的DNA,用PCR可100%檢出病毒序列;用血清陰性共培養(yǎng)陰性同性戀者的標(biāo)本,經(jīng)PCR擴(kuò)增檢出病毒序列者為64%,血清陰性正常人標(biāo)本PCR檢測(cè)也為陰性,表明未出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。由于HIV-1基因組的廣泛的異源性,為提高檢測(cè)的陽(yáng)性率可采用多種引物(如LTR,gag和env基因的引物)。利用PCR法從313份已證實(shí)為抗體陽(yáng)性的標(biāo)本中檢測(cè)出310份HIV陽(yáng)性(99%)。
    (2)血清抗體陰性病人的HIV序列的檢測(cè)
    由于在感染HIV后到出現(xiàn)免疫反應(yīng)之前有一段滯后期,這個(gè)血清學(xué)陰性的滯后期通常長(zhǎng)達(dá)6周至6個(gè)月,而且無(wú)抗體產(chǎn)生期可能更長(zhǎng)些。在此期間受感染者往往檢測(cè)不到抗體,因此,血清陰性的人也可能已感染HIV.PCR法在高危人群中檢測(cè)到HIV-1比由血清學(xué)轉(zhuǎn)陽(yáng)確診的時(shí)間可以提高6個(gè)月。對(duì)少數(shù)初次共培養(yǎng)呈陰性的人,甚至可在血清轉(zhuǎn)陽(yáng)之前24~39個(gè)月就能確診為HIV-1感染。對(duì)血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果不能確定者,也可通過(guò)PCR作進(jìn)一步分析和確診。
    (3)新生兒HIV序列的檢測(cè)
    HIV感染的母親其嬰兒由于母體抗體的存在,用抗體檢測(cè)法通常為陽(yáng)性。但實(shí)際上只有20%~60%的嬰兒受到HIV感染。因此,對(duì)這些嬰兒進(jìn)行HIV感染的早期診斷是十分重要的?,F(xiàn)已證明30~50%的這些新生兒可在母親的子宮里,在分娩和引產(chǎn)或通過(guò)產(chǎn)后哺乳時(shí)從其母體感染HIV.新生兒血清陽(yáng)性者并不能說(shuō)明是HIV感染。因?yàn)槟阁wHIV抗體可持續(xù)大約15個(gè)月之久。在一般情況下,嬰兒并不表現(xiàn)出HIV感染的任何癥狀。病毒細(xì)胞培養(yǎng)法對(duì)嬰兒并不是一種可靠實(shí)用的方法;HIV特異IgM抗體的檢測(cè)在母體抗體存在下也是不可能的;在過(guò)量血清抗體存在下檢出血清中的HIV抗原也是十分困難的。另外,嬰幼兒被HIV感染后病情發(fā)展較快。早期診斷,對(duì)及時(shí)采取治療措施,延緩阻止病情發(fā)展極為重要。目前所使用的抗病毒藥毒性大,因而不能用于HIV抗體陽(yáng)性而未感染的嬰幼兒。但當(dāng)用PCR檢測(cè)出HIV-DNA序列后,即可進(jìn)行抗病毒治療以及加強(qiáng)免疫機(jī)能和營(yíng)養(yǎng)的治療。在一項(xiàng)研究中,14名血清陽(yáng)性母親的新生兒用PCR檢測(cè)其中6個(gè)為陽(yáng)性;在出生后12~15個(gè)月內(nèi)血清陰性的10個(gè)兒童中有5個(gè)為PCR陽(yáng)性。從血清陽(yáng)性母親出生1個(gè)月的新生兒中,收集的外周血單核細(xì)胞經(jīng)PCR檢測(cè),7個(gè)為陽(yáng)性的嬰兒,其中5個(gè)在檢測(cè)后10個(gè)月得AIDS;而PCR陰性的9個(gè)嬰兒,在16個(gè)月的追蹤檢查期間身體狀況良好。這些研究表明,PCR技術(shù)對(duì)被HIV感染母親的新生兒和血清陰性兒童進(jìn)行早期的直接的HIV-1檢測(cè)是十分重要的。
    PCR技術(shù)檢測(cè)HIV-DNA序列對(duì)AIDS和ARC的確診起著重要作用。但也有人認(rèn)為 對(duì)已知HIV抗體、抗原或培養(yǎng)陽(yáng)性的病人不必再做PCR.最合適的PCR檢測(cè)對(duì)象是那些疑有HIV感染但又缺乏確切的血清學(xué)依據(jù)的人群,如上述的HIV陽(yáng)性母親所生的嬰兒,陽(yáng)性患者的性伴侶,靜脈吸毒者和可疑的血清反應(yīng)者。PCR技術(shù)還可用來(lái)檢測(cè)血液制品及疫苗中有無(wú)HIV.
    艾滋病診斷標(biāo)準(zhǔn):
    1.艾滋病病毒抗體陽(yáng)性,又具有下述任何一項(xiàng)者,可為實(shí)驗(yàn)確診艾滋病病人。
    (1)近期內(nèi)(3-6個(gè)月)體重減輕10%以上,且持續(xù)發(fā)熱達(dá)38℃一個(gè)月以上;
    (2)近期內(nèi)(3-6個(gè)月)體重減輕10%以上,且持續(xù)腹瀉(每日達(dá)3-5次)一個(gè)月以上。
    (3)卡氏肺囊蟲(chóng)肺炎(PCR)
    (4)卡波濟(jì)肉瘤KS.
    (5)明顯的霉菌或其他條件致病感染。
    2.若抗體陽(yáng)性者體重減輕、發(fā)熱、腹瀉癥狀接近上述第1項(xiàng)時(shí),可為實(shí)驗(yàn)確診艾滋病病人。
    (1)CD4/CD8(輔助/抑制)淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)比值<1,CD4細(xì)胞計(jì)數(shù)下降;
    (2)全身淋巴結(jié)腫大;
    (3)明顯的中樞神經(jīng)系統(tǒng)占位性病變的癥狀和體征,出現(xiàn)癡呆,辯別能力喪失,或運(yùn)動(dòng)神經(jīng)功能障礙。