第四節(jié) 中藥鑒定的方法
中藥鑒定的對(duì)象復(fù)雜多樣,鑒定的方法也多種多樣。常用的方法有以下幾種:
一、來(lái)源鑒定法
基原鑒定法 步驟:觀(guān)察植物形態(tài)——核對(duì)文獻(xiàn)——核對(duì)標(biāo)本
二、性狀鑒定法
眼看、手摸、鼻聞、口嘗及水試、火試等
特點(diǎn):簡(jiǎn)單易行、迅速、可靠、生動(dòng)易記
(一)藥材
1、形狀: 不同的藥材,往往有其獨(dú)特的外形。如黨參具“獅子盤(pán)頭蘆”;味連形如“雞爪”,又有“過(guò)橋”;天麻之“鸚哥嘴”;防風(fēng)根頭如“蚯蚓頭”;海馬“馬頭蛇尾瓦楞身”;粉防己形似“豬大腸”等。
2、大小
3、顏色:各種藥材的顏色是不相同的。
丹參色紅,紫草色紫,茜草色紅,黃連、黃芩、黃柏、大黃色黃。烏梅色黑等。
4、 表面特征:如:光山藥,光滑。甘草粗糙。人參橫紋。海桐皮具釘刺。香圓枳殼有“金錢(qián)環(huán)”。馬錢(qián)子—毛茸。白頭翁—白色茸毛。蕨類(lèi)根莖—葉柄殘基,鱗片。
5、 質(zhì)地:是指藥材的軟硬,堅(jiān)韌,疏松,粉性,纖維性,粘性等特征。
經(jīng)驗(yàn)鑒別術(shù)語(yǔ):
松泡——南沙參, 粉性——山藥 油潤(rùn)—— 當(dāng)歸
6、斷面特征——折斷時(shí)的現(xiàn)象。
牡丹皮——平坦,顯粉性 黃柏——纖維性,裂片狀分層 杜仲——有膠絲相連 肉桂——顆粒性 茅蒼術(shù)——起霜 甘草——粉塵散落
大黃——“星點(diǎn)” 何首烏——云錦花紋 黃芪——“菊花心”、“金井玉欄”
粉防己——車(chē)輪紋 茅蒼術(shù)——朱砂點(diǎn)
6、氣味——
如:烏梅、山楂、木瓜以味酸為好。黃連、黃柏以味越苦越好。甘草、黨參以味甜為好。
7、 水試:產(chǎn)生特殊的現(xiàn)象,簡(jiǎn)易方便,省時(shí)省力,特殊效果如:紅花加水泡后,水液染成金黃色,藥材不變色。
8、 火試:產(chǎn)生特殊的氣味、顏色、煙霧、閃光和響聲等現(xiàn)象,如麝香少許用火燒時(shí)有輕微的爆鳴聲,起油點(diǎn)似珠,濃香四溢,灰燼白色。
(二)中藥飲片:系指將藥材通過(guò)凈制、切制或炮炙,制成一定規(guī)格的直接供配方、制劑使用的加工藥材。
1、形狀
2、中藥飲片的規(guī)格:①極薄片0.5mm以下,薄片1~2mm,厚片2~4mm;段:長(zhǎng)10~15mm;塊8~12mm的方塊,皮類(lèi)藥材絲寬2~3mm,葉類(lèi)5~10mm.
3、表面 是飲片鑒別特征的地方,飲片可分為外表面和切面。
外表面有的光滑,如:百部、金錢(qián)草、陳皮;有的粗糙:苦參、甘草等
切面:多為橫切面。
雙子葉植物根、根莖和莖有環(huán)狀形成層和放射狀環(huán)列維管束,飲片切面顯環(huán)紋和放射狀紋理,如:丹參、放射狀紋理的密疏形成“菊花心”(黃芪、甘草),“車(chē)輪紋”(防己、大血藤)。黃芪、板藍(lán)根、桔梗切面皮部白色,木部黃色,習(xí)稱(chēng)“金井玉蘭”。
單子葉植物根、根莖有環(huán)狀內(nèi)皮層,不具放射狀紋理,中柱小或維管束散列,飲片切面中心顯小木心(麥冬),或散在筋脈點(diǎn)(莪術(shù))。
雙子葉植物根莖、單子葉植物根切面中間有髓,;而雙子葉植物根、單子葉植物根莖一般中央無(wú)髓。
有的飲片有異常構(gòu)造,牛膝、川牛膝切面顯同心環(huán)排列的筋脈點(diǎn);商陸由多層同心環(huán)構(gòu)成的“羅盤(pán)紋”;何首烏皮部“云錦花紋”;大黃根莖飲片切面上顯“星點(diǎn)”。
蕨類(lèi)植物根莖、葉柄基部的中柱有不同形狀,狗脊、綿馬貫眾的飲片葉柄基部分體中柱環(huán)列,紫萁貫眾呈“U”形。
木質(zhì)藤本植物導(dǎo)管較粗大,飲片切面顯“針眼”(川木通、雞血藤)。樹(shù)皮中韌皮部纖維束或石細(xì)胞群與薄壁組織相間排列,皮類(lèi)中藥顯層狀結(jié)構(gòu)。
分泌組織在切面上也是重要鑒別特征。人參、三七、西洋參具樹(shù)脂道,皮部具黃色小油點(diǎn);蒼術(shù)具大型油室,飲片顯“朱砂點(diǎn)”
細(xì)胞含的成分不同,飲片外表、切面顏色不同。丹參表面紅色、番瀉葉表面綠色、天花粉飲片切面白色、黃柏飲片切面鮮黃色、玄參飲片切面黑色,麻黃飲片切面有朱砂心、檳榔的大理石花紋。
4、質(zhì)地
5、折斷面
6、氣 與炮制方法有關(guān),使用的輔料如:酒氣、炭的焦香氣等。
7、味 木瓜、烏梅飲片含有機(jī)酸味極酸,枸杞子含糖、甘草含甘草甜素味甜;穿心蓮含穿心蓮內(nèi)酯味苦;干姜含姜辣素味辣;海藻含鉀鹽而味咸;地榆、五倍子、檳榔含鞣質(zhì)微澀等。醋制品有醋味,鹽制品有咸味;蜜制有甜味。
三、顯微鑒定法
鑒定內(nèi)容:
①完整藥材的顯微鑒定:橫切片或縱切片
②破碎藥材的顯微鑒定:組織片(橫切片或縱切片)、解離組織片
③粉末藥材的顯微鑒定:粉末片
④中成藥的顯微鑒定:同粉未鑒定的方法。
(一)顯微制片方法
1、橫切面或縱切片制片 完整藥材,選取要觀(guān)察的部位,軟化后切成10~20μm薄片,根據(jù)不同觀(guān)察對(duì)象,滴加試液。
2、表面制片 切取或撕去表皮
3、粉末制片
4、解離組織片 將供試品切成長(zhǎng)約5mm,直徑約2mm的段或厚約1mm的片,如薄壁組織占大部分,木化組織少可用氫氧化鉀法;如質(zhì)地堅(jiān)硬,木化組織較多或集成較大群束,可用硝鉻酸法或氯酸鉀法。
5、花粉粒與孢子制片
6、磨片制片 堅(jiān)硬的礦物藥、動(dòng)物藥。1~2mm
7、含粉末藥材的制劑顯微制片
(二)植物細(xì)胞壁和內(nèi)含物的鑒別
1、細(xì)胞壁性質(zhì)的鑒別:木質(zhì)化細(xì)胞壁:間苯三酚,顯紅色或紫紅色;木栓化(角質(zhì)化)細(xì)胞壁:蘇丹Ⅲ號(hào),加熱后顯紅色;纖維素細(xì)胞壁:氯化鋅碘試液,顯藍(lán)色或紫色;硅質(zhì)化細(xì)胞壁:硫酸無(wú)變化
2、 細(xì)胞內(nèi)含物的鑒定
淀粉粒:加碘試液,藍(lán)色或紫色。用甘油醋酸處理后,未糊化的淀粉粒有偏光,糊化的無(wú)偏光。
糊粉粒:加碘顯棕色,加硝酸汞,顯磚紅色。
脂肪油:加蘇丹Ⅲ號(hào),顯橘紅色、紅色或紫色。加90%乙醇脂肪油不溶解,揮發(fā)油溶解。
菊糖:加10%а-萘酚乙醇液,再加硫酸,現(xiàn)紫紅色并很快溶解。
粘液:加釕紅試液,顯紅色。
草酸鈣結(jié)晶:1、加稀醋酸不溶解,加鹽酸溶解。2、加硫酸,逐漸溶解,然后又析出針狀結(jié)晶。
碳酸鈣結(jié)晶:加稀鹽酸溶解并有氣泡產(chǎn)生。
硅質(zhì)塊: 加硫酸不溶解
(三)顯微測(cè)量 在顯微鏡下測(cè)量細(xì)胞及內(nèi)含物的大小,可用目鏡測(cè)微尺測(cè)量。
(四)顯微常數(shù) 主要有用于葉類(lèi)鑒別的氣孔數(shù)、氣孔指數(shù)、柵表比、脈島數(shù)和脈端數(shù)等
(五)顯微臨時(shí)制片常用的封藏液
水、稀甘油:用來(lái)觀(guān)察淀粉粒、油滴、樹(shù)脂等細(xì)胞內(nèi)含物及細(xì)胞壁的顏色
甘油醋酸試液:常用封藏劑,使淀粉粒不膨脹變性,特別適于觀(guān)察淀粉粒和顯微測(cè)量。
水合氯醛試液:常用的透化劑。方便觀(guān)察細(xì)胞的形狀和組織構(gòu)造以及細(xì)胞內(nèi)含有的各種晶體。
(六)掃描電子顯微鏡和偏光鏡的應(yīng)用
四、理化鑒定法
常用的理化鑒定方法主要有定性反應(yīng)、色譜法和波譜法。具體方法可參考《中國(guó)藥典》附錄
(一) 物理常數(shù)的測(cè)定
(二) 一般理化鑒別
1、化學(xué)定性分析
顏色或沉淀反應(yīng)
生物堿與碘化鉍鉀生成橙色沉淀;蒽醌類(lèi)與堿液反應(yīng)生成橙、紅、藍(lán)色;黃酮類(lèi)與鹽酸鎂粉的反應(yīng),香豆精和內(nèi)酯類(lèi)的異羥肟酸鐵反應(yīng),強(qiáng)心甙的K一K反應(yīng),酚類(lèi)的三氯化鐵反應(yīng),鞣質(zhì)的明膠沉淀反應(yīng),氨基酸的茚三酮反應(yīng),糖類(lèi)的苯酚一硫酸反應(yīng)等。
2、微量升華 如:大黃粉末
3、熒光分析:一般在365nm檢測(cè)。如:黃連折斷面在紫外燈光下顯金黃色熒光。
4、顯微化學(xué)鑒別:切片或粉末置于載玻片上,加化學(xué)試劑產(chǎn)生沉淀或結(jié)晶,顯微鏡下觀(guān)察。
5、泡沫指數(shù)和溶血指數(shù)的測(cè)定 皂苷
(三)檢查
1、水分
2、灰分
3、膨脹度的測(cè)定 區(qū)分南北葶藶子和真假蛤蟆油
4、酸敗度
5、色度檢查 白術(shù)
6、有害物質(zhì)
(1)內(nèi)源性 如: 腎毒性成分馬兜鈴酸及其藥材(包括關(guān)木通、廣防己、青木香、馬兜鈴、天仙藤);肝毒性成分吡咯里西啶生物堿成分及其藥材(農(nóng)吉利、千里光、款冬、佩蘭、豬屎豆)。
(2)外源性 重金屬、有害元素、殘留農(nóng)藥(甘草、黃芪規(guī)定了有機(jī)氯、滴滴涕各不得超過(guò)千萬(wàn)分之二;五氯硝基苯不得超過(guò)千萬(wàn)分之一)、黃曲霉素和二氧化硫等。
(四) 色譜法:TLC、HPLC、GC、蛋白電泳
(五)分光光度法:200~400nm紫外區(qū);400~760nm可見(jiàn)光區(qū);2.5~25um的紅外光區(qū)
(六) 色譜、光譜和質(zhì)譜連用分析
(七)浸出物測(cè)定:冷浸法和熱浸法 ,常用溶劑:水、甲醇、乙醇、乙醚
(八)含量測(cè)定:有容量法、重量法,紫外、高效、薄層、氣相等。
揮發(fā)油:甲法適于測(cè)定相對(duì)密度在1.0以下的揮發(fā)油;乙法測(cè)定密度在1.0以上的揮發(fā)油
含量測(cè)定方法
中藥鑒定的對(duì)象復(fù)雜多樣,鑒定的方法也多種多樣。常用的方法有以下幾種:
一、來(lái)源鑒定法
基原鑒定法 步驟:觀(guān)察植物形態(tài)——核對(duì)文獻(xiàn)——核對(duì)標(biāo)本
二、性狀鑒定法
眼看、手摸、鼻聞、口嘗及水試、火試等
特點(diǎn):簡(jiǎn)單易行、迅速、可靠、生動(dòng)易記
(一)藥材
1、形狀: 不同的藥材,往往有其獨(dú)特的外形。如黨參具“獅子盤(pán)頭蘆”;味連形如“雞爪”,又有“過(guò)橋”;天麻之“鸚哥嘴”;防風(fēng)根頭如“蚯蚓頭”;海馬“馬頭蛇尾瓦楞身”;粉防己形似“豬大腸”等。
2、大小
3、顏色:各種藥材的顏色是不相同的。
丹參色紅,紫草色紫,茜草色紅,黃連、黃芩、黃柏、大黃色黃。烏梅色黑等。
4、 表面特征:如:光山藥,光滑。甘草粗糙。人參橫紋。海桐皮具釘刺。香圓枳殼有“金錢(qián)環(huán)”。馬錢(qián)子—毛茸。白頭翁—白色茸毛。蕨類(lèi)根莖—葉柄殘基,鱗片。
5、 質(zhì)地:是指藥材的軟硬,堅(jiān)韌,疏松,粉性,纖維性,粘性等特征。
經(jīng)驗(yàn)鑒別術(shù)語(yǔ):
松泡——南沙參, 粉性——山藥 油潤(rùn)—— 當(dāng)歸
6、斷面特征——折斷時(shí)的現(xiàn)象。
牡丹皮——平坦,顯粉性 黃柏——纖維性,裂片狀分層 杜仲——有膠絲相連 肉桂——顆粒性 茅蒼術(shù)——起霜 甘草——粉塵散落
大黃——“星點(diǎn)” 何首烏——云錦花紋 黃芪——“菊花心”、“金井玉欄”
粉防己——車(chē)輪紋 茅蒼術(shù)——朱砂點(diǎn)
6、氣味——
如:烏梅、山楂、木瓜以味酸為好。黃連、黃柏以味越苦越好。甘草、黨參以味甜為好。
7、 水試:產(chǎn)生特殊的現(xiàn)象,簡(jiǎn)易方便,省時(shí)省力,特殊效果如:紅花加水泡后,水液染成金黃色,藥材不變色。
8、 火試:產(chǎn)生特殊的氣味、顏色、煙霧、閃光和響聲等現(xiàn)象,如麝香少許用火燒時(shí)有輕微的爆鳴聲,起油點(diǎn)似珠,濃香四溢,灰燼白色。
(二)中藥飲片:系指將藥材通過(guò)凈制、切制或炮炙,制成一定規(guī)格的直接供配方、制劑使用的加工藥材。
1、形狀
2、中藥飲片的規(guī)格:①極薄片0.5mm以下,薄片1~2mm,厚片2~4mm;段:長(zhǎng)10~15mm;塊8~12mm的方塊,皮類(lèi)藥材絲寬2~3mm,葉類(lèi)5~10mm.
3、表面 是飲片鑒別特征的地方,飲片可分為外表面和切面。
外表面有的光滑,如:百部、金錢(qián)草、陳皮;有的粗糙:苦參、甘草等
切面:多為橫切面。
雙子葉植物根、根莖和莖有環(huán)狀形成層和放射狀環(huán)列維管束,飲片切面顯環(huán)紋和放射狀紋理,如:丹參、放射狀紋理的密疏形成“菊花心”(黃芪、甘草),“車(chē)輪紋”(防己、大血藤)。黃芪、板藍(lán)根、桔梗切面皮部白色,木部黃色,習(xí)稱(chēng)“金井玉蘭”。
單子葉植物根、根莖有環(huán)狀內(nèi)皮層,不具放射狀紋理,中柱小或維管束散列,飲片切面中心顯小木心(麥冬),或散在筋脈點(diǎn)(莪術(shù))。
雙子葉植物根莖、單子葉植物根切面中間有髓,;而雙子葉植物根、單子葉植物根莖一般中央無(wú)髓。
有的飲片有異常構(gòu)造,牛膝、川牛膝切面顯同心環(huán)排列的筋脈點(diǎn);商陸由多層同心環(huán)構(gòu)成的“羅盤(pán)紋”;何首烏皮部“云錦花紋”;大黃根莖飲片切面上顯“星點(diǎn)”。
蕨類(lèi)植物根莖、葉柄基部的中柱有不同形狀,狗脊、綿馬貫眾的飲片葉柄基部分體中柱環(huán)列,紫萁貫眾呈“U”形。
木質(zhì)藤本植物導(dǎo)管較粗大,飲片切面顯“針眼”(川木通、雞血藤)。樹(shù)皮中韌皮部纖維束或石細(xì)胞群與薄壁組織相間排列,皮類(lèi)中藥顯層狀結(jié)構(gòu)。
分泌組織在切面上也是重要鑒別特征。人參、三七、西洋參具樹(shù)脂道,皮部具黃色小油點(diǎn);蒼術(shù)具大型油室,飲片顯“朱砂點(diǎn)”
細(xì)胞含的成分不同,飲片外表、切面顏色不同。丹參表面紅色、番瀉葉表面綠色、天花粉飲片切面白色、黃柏飲片切面鮮黃色、玄參飲片切面黑色,麻黃飲片切面有朱砂心、檳榔的大理石花紋。
4、質(zhì)地
5、折斷面
6、氣 與炮制方法有關(guān),使用的輔料如:酒氣、炭的焦香氣等。
7、味 木瓜、烏梅飲片含有機(jī)酸味極酸,枸杞子含糖、甘草含甘草甜素味甜;穿心蓮含穿心蓮內(nèi)酯味苦;干姜含姜辣素味辣;海藻含鉀鹽而味咸;地榆、五倍子、檳榔含鞣質(zhì)微澀等。醋制品有醋味,鹽制品有咸味;蜜制有甜味。
三、顯微鑒定法
鑒定內(nèi)容:
①完整藥材的顯微鑒定:橫切片或縱切片
②破碎藥材的顯微鑒定:組織片(橫切片或縱切片)、解離組織片
③粉末藥材的顯微鑒定:粉末片
④中成藥的顯微鑒定:同粉未鑒定的方法。
(一)顯微制片方法
1、橫切面或縱切片制片 完整藥材,選取要觀(guān)察的部位,軟化后切成10~20μm薄片,根據(jù)不同觀(guān)察對(duì)象,滴加試液。
2、表面制片 切取或撕去表皮
3、粉末制片
4、解離組織片 將供試品切成長(zhǎng)約5mm,直徑約2mm的段或厚約1mm的片,如薄壁組織占大部分,木化組織少可用氫氧化鉀法;如質(zhì)地堅(jiān)硬,木化組織較多或集成較大群束,可用硝鉻酸法或氯酸鉀法。
5、花粉粒與孢子制片
6、磨片制片 堅(jiān)硬的礦物藥、動(dòng)物藥。1~2mm
7、含粉末藥材的制劑顯微制片
(二)植物細(xì)胞壁和內(nèi)含物的鑒別
1、細(xì)胞壁性質(zhì)的鑒別:木質(zhì)化細(xì)胞壁:間苯三酚,顯紅色或紫紅色;木栓化(角質(zhì)化)細(xì)胞壁:蘇丹Ⅲ號(hào),加熱后顯紅色;纖維素細(xì)胞壁:氯化鋅碘試液,顯藍(lán)色或紫色;硅質(zhì)化細(xì)胞壁:硫酸無(wú)變化
2、 細(xì)胞內(nèi)含物的鑒定
淀粉粒:加碘試液,藍(lán)色或紫色。用甘油醋酸處理后,未糊化的淀粉粒有偏光,糊化的無(wú)偏光。
糊粉粒:加碘顯棕色,加硝酸汞,顯磚紅色。
脂肪油:加蘇丹Ⅲ號(hào),顯橘紅色、紅色或紫色。加90%乙醇脂肪油不溶解,揮發(fā)油溶解。
菊糖:加10%а-萘酚乙醇液,再加硫酸,現(xiàn)紫紅色并很快溶解。
粘液:加釕紅試液,顯紅色。
草酸鈣結(jié)晶:1、加稀醋酸不溶解,加鹽酸溶解。2、加硫酸,逐漸溶解,然后又析出針狀結(jié)晶。
碳酸鈣結(jié)晶:加稀鹽酸溶解并有氣泡產(chǎn)生。
硅質(zhì)塊: 加硫酸不溶解
(三)顯微測(cè)量 在顯微鏡下測(cè)量細(xì)胞及內(nèi)含物的大小,可用目鏡測(cè)微尺測(cè)量。
(四)顯微常數(shù) 主要有用于葉類(lèi)鑒別的氣孔數(shù)、氣孔指數(shù)、柵表比、脈島數(shù)和脈端數(shù)等
(五)顯微臨時(shí)制片常用的封藏液
水、稀甘油:用來(lái)觀(guān)察淀粉粒、油滴、樹(shù)脂等細(xì)胞內(nèi)含物及細(xì)胞壁的顏色
甘油醋酸試液:常用封藏劑,使淀粉粒不膨脹變性,特別適于觀(guān)察淀粉粒和顯微測(cè)量。
水合氯醛試液:常用的透化劑。方便觀(guān)察細(xì)胞的形狀和組織構(gòu)造以及細(xì)胞內(nèi)含有的各種晶體。
(六)掃描電子顯微鏡和偏光鏡的應(yīng)用
四、理化鑒定法
常用的理化鑒定方法主要有定性反應(yīng)、色譜法和波譜法。具體方法可參考《中國(guó)藥典》附錄
(一) 物理常數(shù)的測(cè)定
(二) 一般理化鑒別
1、化學(xué)定性分析
顏色或沉淀反應(yīng)
生物堿與碘化鉍鉀生成橙色沉淀;蒽醌類(lèi)與堿液反應(yīng)生成橙、紅、藍(lán)色;黃酮類(lèi)與鹽酸鎂粉的反應(yīng),香豆精和內(nèi)酯類(lèi)的異羥肟酸鐵反應(yīng),強(qiáng)心甙的K一K反應(yīng),酚類(lèi)的三氯化鐵反應(yīng),鞣質(zhì)的明膠沉淀反應(yīng),氨基酸的茚三酮反應(yīng),糖類(lèi)的苯酚一硫酸反應(yīng)等。
2、微量升華 如:大黃粉末
3、熒光分析:一般在365nm檢測(cè)。如:黃連折斷面在紫外燈光下顯金黃色熒光。
4、顯微化學(xué)鑒別:切片或粉末置于載玻片上,加化學(xué)試劑產(chǎn)生沉淀或結(jié)晶,顯微鏡下觀(guān)察。
5、泡沫指數(shù)和溶血指數(shù)的測(cè)定 皂苷
(三)檢查
1、水分
2、灰分
3、膨脹度的測(cè)定 區(qū)分南北葶藶子和真假蛤蟆油
4、酸敗度
5、色度檢查 白術(shù)
6、有害物質(zhì)
(1)內(nèi)源性 如: 腎毒性成分馬兜鈴酸及其藥材(包括關(guān)木通、廣防己、青木香、馬兜鈴、天仙藤);肝毒性成分吡咯里西啶生物堿成分及其藥材(農(nóng)吉利、千里光、款冬、佩蘭、豬屎豆)。
(2)外源性 重金屬、有害元素、殘留農(nóng)藥(甘草、黃芪規(guī)定了有機(jī)氯、滴滴涕各不得超過(guò)千萬(wàn)分之二;五氯硝基苯不得超過(guò)千萬(wàn)分之一)、黃曲霉素和二氧化硫等。
(四) 色譜法:TLC、HPLC、GC、蛋白電泳
(五)分光光度法:200~400nm紫外區(qū);400~760nm可見(jiàn)光區(qū);2.5~25um的紅外光區(qū)
(六) 色譜、光譜和質(zhì)譜連用分析
(七)浸出物測(cè)定:冷浸法和熱浸法 ,常用溶劑:水、甲醇、乙醇、乙醚
(八)含量測(cè)定:有容量法、重量法,紫外、高效、薄層、氣相等。
揮發(fā)油:甲法適于測(cè)定相對(duì)密度在1.0以下的揮發(fā)油;乙法測(cè)定密度在1.0以上的揮發(fā)油
含量測(cè)定方法