線粒體膜通透性
很早就認(rèn)識(shí)到線粒體的膜具有半透性,通過對(duì)半透性的研究導(dǎo)致線粒體各組分分離方法的建立。
■ 線粒體通透性研究
將線粒體放在100 mM蔗糖溶液中,蔗糖穿過外膜進(jìn)入線粒體的膜間間隙;然后將線粒體取出測(cè)定線粒體內(nèi)部蔗糖的平均濃度,結(jié)果只有50 mM, 比環(huán)境中蔗糖的濃度低。據(jù)此推測(cè):線粒體外膜對(duì)蔗糖是通透的,而內(nèi)膜對(duì)蔗糖是不通透的。
左:將線粒體置于含有100 mM的蔗糖溶液中; 中:蔗糖穿過線粒體外膜,達(dá)到平衡;右:將線粒體從蔗糖溶液中取出,測(cè)定線粒體中蔗糖的濃度。如果測(cè)得線粒體的蔗糖平均濃度是50 mM,就可以推測(cè):100mM的蔗糖僅僅穿過了線粒體外膜,而線粒體中有一半流動(dòng)的液體在線粒體基質(zhì),由于內(nèi)膜對(duì)蔗糖不通透,所以測(cè)得的線粒體平均濃度只有50 mM。
■ 線粒體各組分的分離
由于線粒體外膜的通透性比內(nèi)膜高,利用這一性質(zhì),Donal Parsons 和他的同事最先建立了分離線粒體內(nèi)膜、外膜及其他組分的方法.
首先將線粒體置于低滲溶液中使外膜破裂,此時(shí)線粒體內(nèi)膜和基質(zhì)(線粒體質(zhì))仍結(jié)合在一起,通過離心可將線粒體質(zhì)分離。用去垢劑毛地黃皂苷處理線粒體質(zhì),破壞線粒體內(nèi)膜,釋放線粒體基質(zhì),破裂的內(nèi)膜重新閉合形成小泡,其表面有F1顆粒。
很早就認(rèn)識(shí)到線粒體的膜具有半透性,通過對(duì)半透性的研究導(dǎo)致線粒體各組分分離方法的建立。
■ 線粒體通透性研究
將線粒體放在100 mM蔗糖溶液中,蔗糖穿過外膜進(jìn)入線粒體的膜間間隙;然后將線粒體取出測(cè)定線粒體內(nèi)部蔗糖的平均濃度,結(jié)果只有50 mM, 比環(huán)境中蔗糖的濃度低。據(jù)此推測(cè):線粒體外膜對(duì)蔗糖是通透的,而內(nèi)膜對(duì)蔗糖是不通透的。
左:將線粒體置于含有100 mM的蔗糖溶液中; 中:蔗糖穿過線粒體外膜,達(dá)到平衡;右:將線粒體從蔗糖溶液中取出,測(cè)定線粒體中蔗糖的濃度。如果測(cè)得線粒體的蔗糖平均濃度是50 mM,就可以推測(cè):100mM的蔗糖僅僅穿過了線粒體外膜,而線粒體中有一半流動(dòng)的液體在線粒體基質(zhì),由于內(nèi)膜對(duì)蔗糖不通透,所以測(cè)得的線粒體平均濃度只有50 mM。
■ 線粒體各組分的分離
由于線粒體外膜的通透性比內(nèi)膜高,利用這一性質(zhì),Donal Parsons 和他的同事最先建立了分離線粒體內(nèi)膜、外膜及其他組分的方法.
首先將線粒體置于低滲溶液中使外膜破裂,此時(shí)線粒體內(nèi)膜和基質(zhì)(線粒體質(zhì))仍結(jié)合在一起,通過離心可將線粒體質(zhì)分離。用去垢劑毛地黃皂苷處理線粒體質(zhì),破壞線粒體內(nèi)膜,釋放線粒體基質(zhì),破裂的內(nèi)膜重新閉合形成小泡,其表面有F1顆粒。