1.去垂體大白鼠體重法
本法系通過比較生長激素標準品與供試品對幼齡去垂體大白鼠體重增加的程度,以測定供試品效價的一種方法。
標準品溶液的配制
實驗當日,取標準品,按標示效價用含0.1%牛血清白蛋白的0.9%氯化鈉溶液,配制成高、低兩種濃度的稀釋液。一般高濃度稀釋液配成每1ml含0.1~0.2IU,低濃度稀釋液配成每1ml含0.025~0.05IU,高低兩濃度比值(r)一般為1∶0.25,稀釋液分裝成每天劑量并密封-15℃以下保存,臨用時溶化。
供試品溶液的配制
按供試品的標示效價或估計效價,同標準品溶液的配制及保存方法。
動物取同一來源、品系,出生26~28天,體重60~80g,同一性別、健康的大白鼠,試驗前2~3周手術摘除垂體,手術后于清潔級以上動物室飼養(yǎng)使其恢復,備用。
檢查法:取去垂體手術后2~3周、體重變化小于手術前±10%的大白鼠,按體重均勻分成4組,每組至少8只,每只編號并記錄體重。分別自頸部皮下注射一種濃度的標準品或供試品溶液0.5ml,每日一次,連續(xù)6日。最后一次給藥后24小時,處死大鼠,稱重,必要時實驗結束后可進行尸檢,切開蝶鞍區(qū),肉眼檢查有無垂體殘留,剔除有垂體殘存的動物。每只動物給藥后體重增加的克數(shù)作為反應值。供試品與標準品各劑量組所致反應的平均值應相當,低劑量組應較未給藥組體重有明顯的增加,高劑量組體重增加不致達極限。實驗結果按“生物檢定統(tǒng)計法”(附錄ⅪⅤ)中的量反應平行線測定隨機設計法計算效價、實驗誤差??煽啃詼y驗應通過,本法可信限率FL(%)不得大于50%.
2.去垂體大白鼠脛骨法考試論壇
本法系通過比較生長激素標準品與供試品對去垂體大白鼠脛骨骨骺板寬度增加的程度,以決定供試品效價的一種方法。
標準品溶液和供試品溶液的配制同體重法。
檢查法:本法可與去垂體大白鼠體重法同步進行。待體重法實驗結束后,取下兩腿脛骨,10%甲醛保存,從脛骨近心端頂部中間沿矢狀面切開,置10%甲醛中,水洗10分鐘后,置丙酮中10分鐘,水洗3分鐘,2%硝酸銀中染色2分鐘,水洗后置水中強光照射至變棕黑色,10%硫代硫酸鈉固定30秒鐘,置80%乙醇中供測量用。測量時沿刨面切1mm左右薄片置顯微鏡下測量脛骨骨骺板寬度作為反應值。實驗結果按“生物檢定統(tǒng)計法”(附錄ⅩⅠⅤ)中
的量反應平行線測定隨機設計法計算效價、實驗誤差??煽啃詼y驗應通過,本法1去垂體大白鼠體重法
本法系通過比較生長激素標準品與供試品對幼齡去垂體大白鼠體重增加的程度,以測定供試品效價的一種方法。
標準品溶液的配制實驗當日,取標準品,按標示效價用含0.1%牛血清白蛋白的0.9%氯化鈉溶液,配制成高、低兩種濃度的稀釋液。一般高濃度稀釋液配成每1ml含0.1~0.2IU,低濃度稀釋液配成每1ml含0.025~0.05IU,高低兩濃度比值(r)一般為1∶0.25,稀釋液分裝成每天劑量并密封-15℃以下保存,臨用時溶化。
供試品溶液的配制按供試品的標示效價或估計效價,同標準品溶液的配制及保存方法。
動物取同一來源、品系,出生26~28天,體重60~80g,同一性別、健康的大白鼠,試驗前2~3周手術摘除垂體,手術后于清潔級以上動物室飼養(yǎng)使其恢復,備用。
檢查法:取去垂體手術后2~3周、體重變化小于手術前±10%的大白鼠,按體重均勻分成4組,每組至少8只,每只編號并記錄體重。分別自頸部皮下注射一種濃度的標準品或供試品溶液0.5ml,每日一次,連續(xù)6日。最后一次給藥后24小時,處死大鼠,稱重,必要時實驗結束后可進行尸檢,切開蝶鞍區(qū),肉眼檢查有無垂體殘留,剔除有垂體殘存的動物。每只動物給藥后體重增加的克數(shù)作為反應值。供試品與標準品各劑量組所致反應的平均值應相當,低劑量組應較未給藥組體重有明顯的增加,高劑量組體重增加不致達極限。實驗結果按“生物檢定統(tǒng)計法”(附錄ⅪⅤ)中的量反應平行線測定隨機設計法計算效價、實驗誤差??煽啃詼y驗應通過,本法可信限率FL(%)不得大于50%。
本法系通過比較生長激素標準品與供試品對幼齡去垂體大白鼠體重增加的程度,以測定供試品效價的一種方法。
標準品溶液的配制
實驗當日,取標準品,按標示效價用含0.1%牛血清白蛋白的0.9%氯化鈉溶液,配制成高、低兩種濃度的稀釋液。一般高濃度稀釋液配成每1ml含0.1~0.2IU,低濃度稀釋液配成每1ml含0.025~0.05IU,高低兩濃度比值(r)一般為1∶0.25,稀釋液分裝成每天劑量并密封-15℃以下保存,臨用時溶化。
供試品溶液的配制
按供試品的標示效價或估計效價,同標準品溶液的配制及保存方法。
動物取同一來源、品系,出生26~28天,體重60~80g,同一性別、健康的大白鼠,試驗前2~3周手術摘除垂體,手術后于清潔級以上動物室飼養(yǎng)使其恢復,備用。
檢查法:取去垂體手術后2~3周、體重變化小于手術前±10%的大白鼠,按體重均勻分成4組,每組至少8只,每只編號并記錄體重。分別自頸部皮下注射一種濃度的標準品或供試品溶液0.5ml,每日一次,連續(xù)6日。最后一次給藥后24小時,處死大鼠,稱重,必要時實驗結束后可進行尸檢,切開蝶鞍區(qū),肉眼檢查有無垂體殘留,剔除有垂體殘存的動物。每只動物給藥后體重增加的克數(shù)作為反應值。供試品與標準品各劑量組所致反應的平均值應相當,低劑量組應較未給藥組體重有明顯的增加,高劑量組體重增加不致達極限。實驗結果按“生物檢定統(tǒng)計法”(附錄ⅪⅤ)中的量反應平行線測定隨機設計法計算效價、實驗誤差??煽啃詼y驗應通過,本法可信限率FL(%)不得大于50%.
2.去垂體大白鼠脛骨法考試論壇
本法系通過比較生長激素標準品與供試品對去垂體大白鼠脛骨骨骺板寬度增加的程度,以決定供試品效價的一種方法。
標準品溶液和供試品溶液的配制同體重法。
檢查法:本法可與去垂體大白鼠體重法同步進行。待體重法實驗結束后,取下兩腿脛骨,10%甲醛保存,從脛骨近心端頂部中間沿矢狀面切開,置10%甲醛中,水洗10分鐘后,置丙酮中10分鐘,水洗3分鐘,2%硝酸銀中染色2分鐘,水洗后置水中強光照射至變棕黑色,10%硫代硫酸鈉固定30秒鐘,置80%乙醇中供測量用。測量時沿刨面切1mm左右薄片置顯微鏡下測量脛骨骨骺板寬度作為反應值。實驗結果按“生物檢定統(tǒng)計法”(附錄ⅩⅠⅤ)中
的量反應平行線測定隨機設計法計算效價、實驗誤差??煽啃詼y驗應通過,本法1去垂體大白鼠體重法
本法系通過比較生長激素標準品與供試品對幼齡去垂體大白鼠體重增加的程度,以測定供試品效價的一種方法。
標準品溶液的配制實驗當日,取標準品,按標示效價用含0.1%牛血清白蛋白的0.9%氯化鈉溶液,配制成高、低兩種濃度的稀釋液。一般高濃度稀釋液配成每1ml含0.1~0.2IU,低濃度稀釋液配成每1ml含0.025~0.05IU,高低兩濃度比值(r)一般為1∶0.25,稀釋液分裝成每天劑量并密封-15℃以下保存,臨用時溶化。
供試品溶液的配制按供試品的標示效價或估計效價,同標準品溶液的配制及保存方法。
動物取同一來源、品系,出生26~28天,體重60~80g,同一性別、健康的大白鼠,試驗前2~3周手術摘除垂體,手術后于清潔級以上動物室飼養(yǎng)使其恢復,備用。
檢查法:取去垂體手術后2~3周、體重變化小于手術前±10%的大白鼠,按體重均勻分成4組,每組至少8只,每只編號并記錄體重。分別自頸部皮下注射一種濃度的標準品或供試品溶液0.5ml,每日一次,連續(xù)6日。最后一次給藥后24小時,處死大鼠,稱重,必要時實驗結束后可進行尸檢,切開蝶鞍區(qū),肉眼檢查有無垂體殘留,剔除有垂體殘存的動物。每只動物給藥后體重增加的克數(shù)作為反應值。供試品與標準品各劑量組所致反應的平均值應相當,低劑量組應較未給藥組體重有明顯的增加,高劑量組體重增加不致達極限。實驗結果按“生物檢定統(tǒng)計法”(附錄ⅪⅤ)中的量反應平行線測定隨機設計法計算效價、實驗誤差??煽啃詼y驗應通過,本法可信限率FL(%)不得大于50%。