近年來(lái),工業(yè)化用酶在國(guó)外的用途已十分廣泛,例如在食品工業(yè)、飼料工業(yè)、以及在提取天然產(chǎn)物中的應(yīng)用,二十世紀(jì)90年代中期以后我國(guó)也陸續(xù)有研究報(bào)道將用于中藥的提取制備中,取得了較好的效果?,F(xiàn)將國(guó)內(nèi)方面的研究進(jìn)展情況綜述如下。 1 在醫(yī)藥工業(yè)中的應(yīng)用及實(shí)例 1.1 酶法用于中藥提取中的預(yù)處理 1.1.1 近年來(lái),纖維素酶在各領(lǐng)域的應(yīng)用極為廣泛,在中草藥提取方面的工業(yè)化應(yīng)用也已進(jìn)入初開發(fā)階段,國(guó)內(nèi)已民用工業(yè)學(xué)者對(duì)其進(jìn)行了初步探索。大部分中藥材的細(xì)胞壁是由纖維素構(gòu)成的,植物的有效成分往往包裹在細(xì)胞壁內(nèi)。纖維素是β-D-葡萄糖以1,4-β葡糖苷鏈連接的,用纖維素可破壞β-D-葡萄糖鍵,進(jìn)而有利于有效成分的提取。根據(jù)這一原理,國(guó)內(nèi)有人將其用于黃柏提取小檗堿中的預(yù)處理,并與未加酶的提取進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn),經(jīng)薄層層析法測(cè)定,其有效成分小檗堿的收率可從0.870%提高到1.156%。此后又有人研究將其用于黃連、穿心蓮提取時(shí)的預(yù)處理。TLC證明,黃連中小檗堿收率可從2.5148%提高到4.2336%;穿心蓮內(nèi)酯收率可從0.252%提高到0.321%,有效成分的收率均有明顯提高。顯示將纖維素酶用于某些中草藥提取的預(yù)處理有良好的應(yīng)用前景。 1.1.2 另外,有人將木瓜蛋白酶用于補(bǔ)骨脂煎提前的預(yù)處理,補(bǔ)骨脂系豆科植物補(bǔ)骨脂的種子,含有豐富的蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)在煎煮過(guò)程,中,遇熱凝固,影響其他有效成分的煎出。因此可在煎提前用木瓜蛋白酶對(duì)補(bǔ)骨脂粉進(jìn)行預(yù)處理,將蛋白質(zhì)水解成多肽及氨基酸類,遇熱不再凝固,從而促進(jìn)各種有效成分煎出量的增加。與普通煎煮法比較,煎液總氮量提高了2倍,磷脂提高了4倍;補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素提高了近1倍。 1.2 酶法用于中藥有效成分的提取 海參中多糖蛋白類成分用堿法提取時(shí),多糖得率為鮮品海參的0.06%。而采用勻漿技術(shù)胃胰酶降解蛋白質(zhì)的方法,提取的海參多糖為鮮品海參的1.45~1.61%,同時(shí)由于蛋白質(zhì)降解程度高,氨基酸、多肽類等其他生物活性成分也較高,取得了良好的提取效果。不家報(bào)道有學(xué)者采用復(fù)合酶解和熱水浸提法綜合程序分離純化香菇中多糖蛋白,與單純熱水浸提法等其他方法相比,總氨基酸與必需氨基酸的含量均提高了2倍以上,香菇多糖含量提高了4倍,且酶解后大大改善了糖類分布,具有抗腫瘤抗病毒活性的具有較高分子量的香菇多糖的相對(duì)含量明顯提高,效果極其顯著。此外,有文獻(xiàn)報(bào)道日本高根芳春提出了用酶法提取銀杏葉有效成分的方法。該法通過(guò)加入糊精及對(duì)葡萄糖殘基有轉(zhuǎn)移作用的葡萄糖甙酶或轉(zhuǎn)糖甙酶,使油溶性或難溶于水或不溶于水的有效成分,轉(zhuǎn)變成易溶于水的成分而提取出來(lái)。經(jīng)分光光度法測(cè)定,其總黃酮含量為13.6%,黃酮提取率為0.38%,與未經(jīng)轉(zhuǎn)糖甙反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)(總黃酮提取率為0.22%)比較,總黃酮提取率提高了0.16%。采用該法能同時(shí)提取出銀杏葉中水溶性和脂溶性有效成分,使有效成分的提取率提高。且使轉(zhuǎn)化為糖甙后的脂溶性成分在體內(nèi)的吸收率大為提高。 2 酶提取主要工藝因素分析 2.1 藥材預(yù)處理 為利于酶解,需對(duì)藥材進(jìn)行預(yù)處理。如用球磨機(jī)作預(yù)處理,粉碎顆粒越細(xì),越易懸浮在酶解液中,增加有效面積而易被酶水解,加快水解速度。 2.2 pH、溫度及酶解作用時(shí)間 根據(jù)所提取的中藥材的品種及所使用的酶的種類不同,酶解時(shí)的最適pH及最適溫度會(huì)有所不同,應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)來(lái)確定值。如纖維素酶水解纖維素時(shí),宜在50℃及pH4.5的條件下進(jìn)行;而復(fù)合酶提取香菇多糖蛋白時(shí),則宜在40℃及pH6.4時(shí)進(jìn)行。 此外,酶解作用時(shí)間也是直接影響提取效果的因素。為得到所需的酶解產(chǎn)物,需要控制好酶的作用時(shí)間。如復(fù)合酶解提取香菇多糖蛋白時(shí)經(jīng)測(cè)定,以60min為最適宜,時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短均會(huì)影響提取效果。 3 酶法提取技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)及其應(yīng)用前景 以上研究均顯示,某些中藥用酶法提取時(shí)收率明顯提高,具有較大的應(yīng)用潛力,但該技術(shù)同時(shí)也存在著一定的局限性。酶法提取對(duì)實(shí)驗(yàn)條件要求較高,為使酶發(fā)揮作用,需先通過(guò)實(shí)驗(yàn)確定通過(guò)最適溫度、pH及最適作用時(shí)間等。能否將其用于工業(yè)化的中藥提取中,還需綜合考慮酶的濃度、底物的濃度、抵制劑和激動(dòng)劑等對(duì)提取物有何影響,故有先進(jìn)進(jìn)一步深入研究探討。但隨著對(duì)該技術(shù)的不斷消化吸收、研究應(yīng)用,酶法作為新技術(shù)將為中藥的提取提供一種新途徑。

