糖類和苷類藥物的分析
☆ ☆考點(diǎn)1：葡萄糖的分析
1．結(jié)構(gòu)及性質(zhì)
《中國(guó)藥典》收載的葡萄糖為D-（+）-吡喃葡萄糖的一水合物，其結(jié)構(gòu)為：
葡萄糖為醛糖，具有還原性；葡萄糖還有多個(gè)不對(duì)稱碳原子，具有旋光性，為右旋體。
2．鑒別
（1）與堿性酒石酸銅試液的反應(yīng)。葡萄糖的醛基具有還原性，在堿性條件下可將銅離子還原，生成紅色的氧化亞銅沉淀。取本品約0.2g，加水5ml溶解后，緩緩滴入溫?zé)岬膲A性酒石酸銅試液中，即生成氧化亞銅的紅色沉淀。
（2）測(cè)定比旋度。葡萄糖具有旋光性，比旋度是其重要的物理常數(shù)，測(cè)定比旋度可以鑒別藥物，也可以反映藥物的純雜程度?！吨袊?guó)藥典》在葡萄糖的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中收載有比旋度的測(cè)定項(xiàng)目，
測(cè)定方法：取本品約10g，精密稱定，置100ml量瓶中，加水適量與氨試液0.2ml，溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘，在25℃時(shí)，依法測(cè)定，比旋度為+52.5°～53.0°。
配制時(shí)加氨試液0.2ml，并放置10分鐘是為了達(dá)到變旋平衡后再測(cè)定，詳見(jiàn)葡萄糖含量測(cè)定項(xiàng)下。
若測(cè)得的旋光度為α°，則比旋度的計(jì)算公式為：
式中，W--供試品的稱樣量，g；l--光路長(zhǎng)度，dm。
（3）紅外光譜法。本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集464圖）一致。
3．特殊雜質(zhì)檢查
（1）溶液的澄清度與顏色。用于檢查水中不溶性物質(zhì)和有色雜質(zhì)。
檢查方法：取本品5g，加熱水溶解后，放冷，用水稀釋至10ml，溶液應(yīng)澄清無(wú)色；如顯渾濁，與1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更濃；如顯色，與對(duì)照液（取比色用氯化鈷液3ml、比色用重酸鉀液3ml與比色用硫酸銅液6ml，加水稀釋成50ml）1.0ml加水稀釋至10ml比較，不得更深。
（2）亞硫酸鹽和可溶性淀粉。亞硫酸鹽可能是在硫酸水解淀粉制備葡萄糖過(guò)程中，部分硫酸被還原所生成的；可溶性淀粉為生產(chǎn)中引入的中間體。
為了控制亞硫酸鹽和可溶性淀粉的限量，取本品1.0g，加水10ml溶解后，加碘試液1滴，應(yīng)即顯黃色。如有亞硫酸鹽存在，則碘會(huì)褪色；如有可溶性淀粉，則呈藍(lán)色。
（3）蛋白質(zhì)。制備葡萄糖的原料多為淀粉，它來(lái)自于植物的莖、根或種子，所以在提取過(guò)程中?；烊氲鞍踪|(zhì)。因此，利用蛋白質(zhì)類雜質(zhì)遇酸可產(chǎn)生沉淀的性質(zhì)，取本品1.0g，加水10ml溶解后，加磺基水楊酸溶液（1→5）3ml，不得發(fā)生沉淀。
（4）乙醇溶液的澄清度。用于控制葡萄糖中的糊精，葡萄糖可溶于熱乙醇，而糊精溶解度小。取樣品1.0g，加90%乙醇30ml，置水浴上加熱回流約10分鐘，溶液應(yīng)澄清。
此外，對(duì)一般雜質(zhì)，如干燥失重、熾灼殘?jiān)㈣F鹽、重金屬和砷鹽等，均進(jìn)行檢查。
4．含量測(cè)定
葡萄糖分子結(jié)構(gòu)中含有多個(gè)手性碳原子，具有旋光性，其比旋度能反映出藥物的純度。因此《中國(guó)藥典》中未收載含量測(cè)定項(xiàng)目，而對(duì)比旋度的范圍作了嚴(yán)格的規(guī)定，規(guī)定一水合物在25℃的比旋光度應(yīng)為+52.5°～+53.0°。
☆ ☆☆考點(diǎn)2：葡萄糖注射液的分析
1．葡萄糖注射液中5-羥甲基糠醛的檢查
葡萄糖水溶液在弱酸性時(shí)較穩(wěn)定，但在高溫加熱滅菌時(shí)，葡萄糖易分解產(chǎn)生5-羥甲基糖醛（I）、乙酰丙酸與甲酸。5-羥甲基糠醛量的增加與滅菌溫度的時(shí)間成正比。分解反應(yīng)如下：
5-羥甲基糠醛對(duì)人體有害，它的量也可以反映葡萄糖分解的情況，需進(jìn)行檢查：5-羥甲基糠醛分子具共軛雙烯結(jié)構(gòu)，在284nm波長(zhǎng)處具吸收，利用此性質(zhì)，精密量取葡萄糖注射液適量（約相當(dāng)于葡萄糖0.1g），置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，置于1cm吸收池中，在284nm的波長(zhǎng)處測(cè)定，吸收度不得大于0.32。
2．葡萄糖注射液的含量測(cè)定
（1）測(cè)定方法。精密量取本品適量（約相當(dāng)于葡萄糖10g），置100ml量瓶中，加氨試液0.2ml（10%或10%以下規(guī)格的本品可直接取樣測(cè)定），用水稀釋至刻度搖勻，靜置10分鐘，依法測(cè)定旋光度，與2.0852相乘，即得供試量中含有C6H12O6•H2O的質(zhì)量（g）。
（2）測(cè)定中加入氨試液的作用。葡萄糖有α及β兩種互變異構(gòu)體，在水溶液中形成下列平衡狀態(tài)：
由上式可見(jiàn)，α及β兩種互變異構(gòu)體的比旋度相差甚遠(yuǎn)，而在水溶液中逐漸形成平衡，此時(shí)的比旋度也趨于恒定，為+52.5°～+53.0°，這種現(xiàn)象稱為葡萄糖的變旋現(xiàn)象。因此，當(dāng)進(jìn)行葡萄糖旋光度測(cè)定時(shí)，首先應(yīng)使上述反應(yīng)達(dá)到平衡，一般放置至少6小時(shí)。若加熱、加酸或加弱堿，均可加速平衡的到達(dá)?！吨袊?guó)藥典》采用加氨試液的方法，加速變旋平衡的到達(dá)。
（3）計(jì)算因數(shù)2.0852的由來(lái)。+52.75°為無(wú)水葡萄糖的比旋度，按下式計(jì)算無(wú)水葡萄糖的濃度：
如果換算成含水葡萄糖濃度（c'）時(shí)，則應(yīng)為：
3．葡萄糖氯化鈉注射液含量測(cè)定
（1）葡萄糖。取本品，照葡萄糖注射液項(xiàng)下的方法測(cè)定，即得。
（2）氯化鈉。本品中的氯化鈉用銀量法測(cè)定。精密量取本品20ml，加水30ml，加2%糊精溶液5ml、2.5%硼砂溶液2ml與熒光黃指示液5～8滴，用硝酸銀滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml的硝酸銀滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于5.844mg的NaCl。
加糊精溶液以形成保護(hù)膠體，使氯化銀沉淀呈膠體狀態(tài)，則具有較大的表面，有利于對(duì)指示劑的吸附，有利于滴定終點(diǎn)的觀察。
葡萄糖氯化鈉注射液的pH值較低，經(jīng)試驗(yàn)，溶液pH值如在3.5左右時(shí)，則無(wú)終點(diǎn)出現(xiàn)；加入2.5%硼砂溶液2ml后，溶液pH值為7，可促使熒光黃電離，以增大熒光黃陰離子的有效濃度，使終點(diǎn)變化敏銳。
☆ ☆考點(diǎn)1：葡萄糖的分析
1．結(jié)構(gòu)及性質(zhì)
《中國(guó)藥典》收載的葡萄糖為D-（+）-吡喃葡萄糖的一水合物，其結(jié)構(gòu)為：
葡萄糖為醛糖，具有還原性；葡萄糖還有多個(gè)不對(duì)稱碳原子，具有旋光性，為右旋體。
2．鑒別
（1）與堿性酒石酸銅試液的反應(yīng)。葡萄糖的醛基具有還原性，在堿性條件下可將銅離子還原，生成紅色的氧化亞銅沉淀。取本品約0.2g，加水5ml溶解后，緩緩滴入溫?zé)岬膲A性酒石酸銅試液中，即生成氧化亞銅的紅色沉淀。
（2）測(cè)定比旋度。葡萄糖具有旋光性，比旋度是其重要的物理常數(shù)，測(cè)定比旋度可以鑒別藥物，也可以反映藥物的純雜程度?！吨袊?guó)藥典》在葡萄糖的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中收載有比旋度的測(cè)定項(xiàng)目，
測(cè)定方法：取本品約10g，精密稱定，置100ml量瓶中，加水適量與氨試液0.2ml，溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，放置10分鐘，在25℃時(shí)，依法測(cè)定，比旋度為+52.5°～53.0°。
配制時(shí)加氨試液0.2ml，并放置10分鐘是為了達(dá)到變旋平衡后再測(cè)定，詳見(jiàn)葡萄糖含量測(cè)定項(xiàng)下。
若測(cè)得的旋光度為α°，則比旋度的計(jì)算公式為：
式中，W--供試品的稱樣量，g；l--光路長(zhǎng)度，dm。
（3）紅外光譜法。本品的紅外光吸收?qǐng)D譜應(yīng)與對(duì)照的圖譜（光譜集464圖）一致。
3．特殊雜質(zhì)檢查
（1）溶液的澄清度與顏色。用于檢查水中不溶性物質(zhì)和有色雜質(zhì)。
檢查方法：取本品5g，加熱水溶解后，放冷，用水稀釋至10ml，溶液應(yīng)澄清無(wú)色；如顯渾濁，與1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更濃；如顯色，與對(duì)照液（取比色用氯化鈷液3ml、比色用重酸鉀液3ml與比色用硫酸銅液6ml，加水稀釋成50ml）1.0ml加水稀釋至10ml比較，不得更深。
（2）亞硫酸鹽和可溶性淀粉。亞硫酸鹽可能是在硫酸水解淀粉制備葡萄糖過(guò)程中，部分硫酸被還原所生成的；可溶性淀粉為生產(chǎn)中引入的中間體。
為了控制亞硫酸鹽和可溶性淀粉的限量，取本品1.0g，加水10ml溶解后，加碘試液1滴，應(yīng)即顯黃色。如有亞硫酸鹽存在，則碘會(huì)褪色；如有可溶性淀粉，則呈藍(lán)色。
（3）蛋白質(zhì)。制備葡萄糖的原料多為淀粉，它來(lái)自于植物的莖、根或種子，所以在提取過(guò)程中?；烊氲鞍踪|(zhì)。因此，利用蛋白質(zhì)類雜質(zhì)遇酸可產(chǎn)生沉淀的性質(zhì)，取本品1.0g，加水10ml溶解后，加磺基水楊酸溶液（1→5）3ml，不得發(fā)生沉淀。
（4）乙醇溶液的澄清度。用于控制葡萄糖中的糊精，葡萄糖可溶于熱乙醇，而糊精溶解度小。取樣品1.0g，加90%乙醇30ml，置水浴上加熱回流約10分鐘，溶液應(yīng)澄清。
此外，對(duì)一般雜質(zhì)，如干燥失重、熾灼殘?jiān)㈣F鹽、重金屬和砷鹽等，均進(jìn)行檢查。
4．含量測(cè)定
葡萄糖分子結(jié)構(gòu)中含有多個(gè)手性碳原子，具有旋光性，其比旋度能反映出藥物的純度。因此《中國(guó)藥典》中未收載含量測(cè)定項(xiàng)目，而對(duì)比旋度的范圍作了嚴(yán)格的規(guī)定，規(guī)定一水合物在25℃的比旋光度應(yīng)為+52.5°～+53.0°。
☆ ☆☆考點(diǎn)2：葡萄糖注射液的分析
1．葡萄糖注射液中5-羥甲基糠醛的檢查
葡萄糖水溶液在弱酸性時(shí)較穩(wěn)定，但在高溫加熱滅菌時(shí)，葡萄糖易分解產(chǎn)生5-羥甲基糖醛（I）、乙酰丙酸與甲酸。5-羥甲基糠醛量的增加與滅菌溫度的時(shí)間成正比。分解反應(yīng)如下：
5-羥甲基糠醛對(duì)人體有害，它的量也可以反映葡萄糖分解的情況，需進(jìn)行檢查：5-羥甲基糠醛分子具共軛雙烯結(jié)構(gòu)，在284nm波長(zhǎng)處具吸收，利用此性質(zhì)，精密量取葡萄糖注射液適量（約相當(dāng)于葡萄糖0.1g），置100ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，置于1cm吸收池中，在284nm的波長(zhǎng)處測(cè)定，吸收度不得大于0.32。
2．葡萄糖注射液的含量測(cè)定
（1）測(cè)定方法。精密量取本品適量（約相當(dāng)于葡萄糖10g），置100ml量瓶中，加氨試液0.2ml（10%或10%以下規(guī)格的本品可直接取樣測(cè)定），用水稀釋至刻度搖勻，靜置10分鐘，依法測(cè)定旋光度，與2.0852相乘，即得供試量中含有C6H12O6•H2O的質(zhì)量（g）。
（2）測(cè)定中加入氨試液的作用。葡萄糖有α及β兩種互變異構(gòu)體，在水溶液中形成下列平衡狀態(tài)：
由上式可見(jiàn)，α及β兩種互變異構(gòu)體的比旋度相差甚遠(yuǎn)，而在水溶液中逐漸形成平衡，此時(shí)的比旋度也趨于恒定，為+52.5°～+53.0°，這種現(xiàn)象稱為葡萄糖的變旋現(xiàn)象。因此，當(dāng)進(jìn)行葡萄糖旋光度測(cè)定時(shí)，首先應(yīng)使上述反應(yīng)達(dá)到平衡，一般放置至少6小時(shí)。若加熱、加酸或加弱堿，均可加速平衡的到達(dá)?！吨袊?guó)藥典》采用加氨試液的方法，加速變旋平衡的到達(dá)。
（3）計(jì)算因數(shù)2.0852的由來(lái)。+52.75°為無(wú)水葡萄糖的比旋度，按下式計(jì)算無(wú)水葡萄糖的濃度：
如果換算成含水葡萄糖濃度（c'）時(shí)，則應(yīng)為：
3．葡萄糖氯化鈉注射液含量測(cè)定
（1）葡萄糖。取本品，照葡萄糖注射液項(xiàng)下的方法測(cè)定，即得。
（2）氯化鈉。本品中的氯化鈉用銀量法測(cè)定。精密量取本品20ml，加水30ml，加2%糊精溶液5ml、2.5%硼砂溶液2ml與熒光黃指示液5～8滴，用硝酸銀滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml的硝酸銀滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于5.844mg的NaCl。
加糊精溶液以形成保護(hù)膠體，使氯化銀沉淀呈膠體狀態(tài)，則具有較大的表面，有利于對(duì)指示劑的吸附，有利于滴定終點(diǎn)的觀察。
葡萄糖氯化鈉注射液的pH值較低，經(jīng)試驗(yàn)，溶液pH值如在3.5左右時(shí)，則無(wú)終點(diǎn)出現(xiàn)；加入2.5%硼砂溶液2ml后，溶液pH值為7，可促使熒光黃電離，以增大熒光黃陰離子的有效濃度，使終點(diǎn)變化敏銳。