病理組織學(xué)常用制備技術(shù)-組織的固定

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一、組織的固定(一)固定的概念應(yīng)用各種方法使病理標(biāo)本盡量保持其離體前狀態(tài)的過(guò)程稱(chēng)為固定。
    病 理標(biāo)本(樣本)離體后,由于微環(huán)境的變化將發(fā)生自溶和(或)腐敗,使其結(jié)構(gòu)破壞。固定的目的和機(jī)制是:①使蛋白質(zhì)凝固,終止或減少分解酶的作用,防止自 溶,保存組織、細(xì)胞的離體前結(jié)構(gòu)狀態(tài),包括保存組織或細(xì)胞的抗原性,使抗原不失活,不發(fā)生彌散。②保存組織、細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂肪、糖原、某些維生素及病 理性蓄積物,維持病變的特異性特征。③使上述物質(zhì)轉(zhuǎn)為不溶解狀態(tài),防止和盡量減少制片過(guò)程中人為的溶解和丟失。④起助染作用。
    固定方法有:①物理學(xué)方法,如低溫冷凍,干冰(即固態(tài)無(wú)水碳酸)冰凍真空脫水,石蠟滲入法。②化學(xué)方法,采用各種化學(xué)溶液作固定液,使組織細(xì)胞進(jìn)入固定狀態(tài)。這是國(guó)內(nèi)最常用的方法。
    固定應(yīng)在標(biāo)本離體后盡快進(jìn)行,小標(biāo)本可在取材后直接放入固定液內(nèi),大標(biāo)本應(yīng)在手術(shù)結(jié)束前或結(jié)束后迅速放入固定液內(nèi)。
    固定液與標(biāo)本的比例不得少于標(biāo)本體積得5倍。有特殊要求者應(yīng)事先選定相應(yīng)得固定液,如欲查糖原,應(yīng)選擇無(wú)水乙醇作固定液等。
    固定得時(shí)間應(yīng)適當(dāng),微小標(biāo)本(如胃粘膜等)2~4h即可,大標(biāo)本應(yīng)置放12~24h,但亦不要過(guò)久,以免影響抗原性,造成免疫組化操作中得困難。